Меню Рубрики

Пцр на бруцеллез отрицательно

Поиск Последние темы Горячие темы Список участников На главную страницу
Регистрация / Вход

Зарегистрирован: 19/03/2014 14:43:40
Сообщений: 547
Оффлайн

Аннв М. wrote: Добрый день!
Опишу ситуацию.
Содержу коз в количестве 15гол, на участке, безвыпасно, траву не кошу, животные только на сене, контактов у моих животных с другими МРС не было, мои животные доступ за пределы участка не имеют. При проведении планового исследования на бруцеллез в 2014г все результаты отрицательные, после этого ввоза животных в мое хозяйство не было.
Весной 2015 года планового исследования не было, а провели его в октябре 2015г(возможно это был эпизоотический мониторинг) При этом в нашем населенном пункте выявлено четыре положительнореагирующих животных МРС. В том числе мое животное, козочка, рожденная в моем хозяйстве в 2014 г. Мать ее отр, козел, ее крывший — отр, пятеро коз, живших с ней в одной стайке на протяжении более 1 года, — отр. Результаты РА 1:200, Рид положит. Мы с муже уже тоже сдали на бруцеллез — отриц.
В нашей местности до этого ни разу за обозримые года не было выявлено ни одного случая заболевания бруцеллезом.
Козочка на момент исследования была беременна со сроком 2 мес. Помимо этого до беременности была обезрожена, но пошло инфицирование пазух, после проведения антибиотикотерапии состояние улучшилось. Но возможно очаг инфекции в пазухах остался., так как коза опять стала пугливой и голову трогать не дает.
После выявления, козочка была изолирована. Все оставшееся поголовье повторно исследовано, все отрицательно, вчера сделали уже второй забор крови.
Провести повторное исследование положительно среагировавщего животного мне отказали. Выписали предписание на убой.
Я за свои средства провела исследование цельной крови в ПЦР, результат отрицательный.
Имели ли право мне отказать в повторном исследовании животного? При этом, диагноз установила лаборатория. Никто из врачей не выезжал в мое хозяйство, не проводил исследование ситуации. Все мои попытки провести повторное исследование встретили категорический отказ. Более того передать всю ругань, что я услышала в свой адрес, невозможно, врач эпизоотолог совершенно неадекватна.

Других положительно реагирующих животных уже забили, вскрытие ветсанэкспертом никаких изменений не выявило, пат материал на исследование, естесственно, никто не отправлял. При этом все замалчивается, скрывается, никто ничего не знает. Даже о том, что пришли результаты повторных анализов мне не сообщили.

Может ли это быть ложноположительная реакция в связи с беременностью, с воспалительным процессом?

Какие действия мне можно предпринять для установления диагноза?

Добрый день.
Могу Вам только посочувствовать. Но, боюсь, ваша козочка инфицирована. У коз положительным считается РА 1:100, а тут еще и РИД положительный. Что касается ПЦР крови, то это бессмысленный анализ, так как бруцелла находится в крови очень короткое время, в момент острой фазы. Далее она локализуется в суставах, половых органах. Поэтому, как правило, ПЦР крови всегда отрицательный. Показательным он будет при исследовании смывов с влагалища или абортированных плодов.
Так что, советую, поплакать и быстро забить и утилизировать .
И радоваться, что остальное стадо здорово. Я ж правильно понял, что повторные анализы тоже отрицательны? И люди здоровы! Бруцелла мелитензис очень вирулентна, заболеть можно на раз. Не лечится. Человек сразу получает инвалидность. Что касается повторного исследования положительно реагирующего животного, то инструкциями и руководствами это не предусмотрено, опять же из-за опасности заражения.
На счет замалчивания — это вряд ли. У Вас должен быть наложен карантин на весь поселок.

И есть вопрос — а почему Вы не вакцинируете свое стадо?

Зарегистрирован: 17/12/2015 08:41:34
Сообщений: 10
Оффлайн

Во-первых, забор крови провели в нарушение Ветеринарных правил ВП 13.3.1302-963. 2.2.3. Коров (нетелей), буйволиц и верблюдиц исследуют независимо от периода беременности, овцематок (козематок) и свиноматок через 1-2 месяца после окота или опороса, молодняк животных всех видов — с 4-месячного возраста. Хотя были предупреждены, что животные беременны.
А в инструкции О МЕРОПРИЯТИЯХ ПО ПРОФИЛАКТИКЕ И ЛИКВИДАЦИИ БРУЦЕЛЛЕЗА ЖИВОТНЫХ в разделе диагностика бруцеллеза есть пункт
2.6. В случае, когда в благополучном по бруцеллезу стаде (на ферме) при плановом исследовании от отдельных животных сывороток крови в РА (в том числе при переисследовании проб, положительных по РБП, но отрицательных по РСК) получен положительный результат — у крупного рогатого скота и лошадей в титре не более 200 международных единиц (МЕ), у буйволов, овец, коз и свиней — 100 МЕ, таких животных немедленно изолируют и через 15 — 20 дней дополнительно исследуют на бруцеллез комплексно серологическими (РА и РСК или РДСК) и аллергическим (кроме лошадей) методами. Одновременно этими же методами исследуют остальных животных стада (фермы).

Если при повторном исследовании в стаде (отаре) не выявлено реагирующих и отсутствуют другие признаки, вызывающие подозрение на заболевание животных бруцеллезом (аборты и проч.), а у исследованных ранее животных титр антител в РА не повысился, РСК (РДСК) и аллергическая проба окажутся отрицательными, то стадо считают благополучным в отношении бруцеллеза.

Более того в этой же главе написано, что даже если произошли аборты, делается бакисследование, животные полож реагируют, то их исследуют повторно!

Но ветеринары, сказали,что это не действующая(!) инструкция.

Почему такая перестраховка? Когда брали кровь на ПЦР, я покупала вакуумные прбирки, ни капли крови не было. Да и когда первично брали кровь, что не было угрозы, когда еще не знали о результатах?

У нас местность БЛАГОПОЛУЧНА и до этого скрининга не было НИ ОДНОГО положительного животного, более того даже сомнительного. Почему я должна прививать животных от того, чего отродясь у нас не было. У нас Ханты-Мансийский округ, не сельхоз район, не было бруцеллеза. И откуда он мог взятся лично в моем хозяйстве — это загадка. А доводы врачей, что типа с ногами занесли, я в сарай в уличной обуви не бегаю, да и три другие положительные головы живут за чертой города, а я в черие на другом конце от их всех. Общих стад у нас нет, пастбищ нет. Да и мои вообще за калитку не выходят.

На данный момент на мое хозяйство наложено ограничение. Так как они нарушили правила и взяли кровь у беременной козы, то мне ветинспектор написал письмо, что я должна содержать животное изолированно и через 2 мес после окота провести анализ. Я предложила во время родов, соблюдая осторожность, собрать околоплодные воды и оболочки плодов для исследования ПЦР или бак исследования. Мне заявили, что делать не будут и эти анализы не являются для них показательными.

Зарегистрирован: 17/12/2015 08:41:34
Сообщений: 10
Оффлайн

Я бы именно так себя и повела, если бы изначально они соблюдали инструкции. И не несли ахинеи по поводу недействующих инструкции. И вообще, пошли бы со мной на контакт и рассмотрели мою ситуацию. И не начали орать и везде заявлять, что я взятки сую и тому подобное, а также кричать, что я лаборатории не доверяю. А на мой вопрос о дополнительном исследовании, заявили, что я не имею права проводить анализы в других лабораториях, а только в той которая выявила положит. реакцию. Эти заявления как мне расценивать?! Идти на поводу их безграмотности и попоприкрывательстве я не хочу. И тянуть с исследованиями и гадать на кофейной гуще тоже не хочу. Я предложила за свой счет доставить и сделать любые исследования, которые необходимы для уточнения диагноза. В ответ, только , что они отказываются мне помогать, кровь не возьмут, сопроводительную не напишут(без нее сами понимаете, лаборатория не примет).

Зарегистрирован: 19/03/2014 14:43:40
Сообщений: 547
Оффлайн

Зарегистрирован: 17/12/2015 08:41:34
Сообщений: 10
Оффлайн

Кровь можно взять в вакуумные пробирки, сыворотку тоже можно отделить, соблюдая правила. А по поводу плодных оболочек. После убоя все равно ветсанэксперт будет разделывать тушу, брать пат материал, ту же матку, плоды для бак исследования. И также я их повезу для исследования и за свои деньги. А так я еще б и ПЦР сделала. В чем разница? Почему нельзя сделать при жизни?
А насчет риска, ветеринар — это такая работа. Знаешь на что идешь.

Вот как то, так. Не подумайте, что нападаю, просто вопросов больше чем ответов. Все очень неоднозначно.

Зарегистрирован: 19/03/2014 14:43:40
Сообщений: 547
Оффлайн

Тест-системы должны быть чистыми. А что касается «бактериологических исследований», то, как мне известно, их нигде не делают! Ввиду большой опасности для персонала. Исключением, видимо, являются НИИ.

Да все можно. Согласен. Найдите ветеринара, любого, скажите ему про диагноз (обязательно!!) и попросите взять анализы Никаких проблем.
Ветсанэксперт — это не Вы, он имеет на это полномочия. Ну и сделайте ПЦР. Кстати, исследования на бруцеллез при возникновении очага проводятся за счет государства. И ПЦР они могут сами сделать.

На счет того, что ветеринар=камикадзе, не уверен.

Зарегистрирован: 19/03/2014 14:43:40
Сообщений: 547
Оффлайн

Зарегистрирован: 17/12/2015 08:41:34
Сообщений: 10
Оффлайн

Зарегистрирован: 17/12/2015 08:41:34
Сообщений: 10
Оффлайн

Я не знаю каков механизм этого независимого анализа. К кому обратится? Что делать? Вот и предлагаю в качестве анализа взять патматериал во время родов, а они
Я ж не понимаю каков механизм этого всего.
Вот сюда и написала, может что подскажут.
Спасибо, за проявленный Вами интерес.

Зарегистрирован: 19/03/2014 14:43:40
Сообщений: 547
Оффлайн

Сделайте, конечно, запрос. Посмотрим, что ответят дней через 30. В данном случае, не так важна последовательность действий по инструкции, как полученный результат. Уверен, там все объяснят. Я б тоже мог, времени нет Да и не так это важно.
Про бак исследования — вы уверены, что именно бактериологические, а не бактериоскопические на бруцеллез?
Имеете ВЫ ПРАВО, если хотите, уверены в своей правоте и не боитесь!!
Я взял, отвез в другую лабораторию, получил отрицательный результат. УБЕДИЛСЯ, что я прав!! И после этого, заставил провести повторные официальные исследования. Чуть до драки не дошло. Но я победил. Они ошиблись.
Но у вас тут немного другая ситуация.

И, еще раз, Вы имеете дело не с ветврачами, а с ветинспекторами Департамента. Наверняка. Это уже не дело ветврачей СББЖ. От них уже ничего не зависит.

Аннв М. wrote:
А про Наставление они вообще слышать не хотят, это для лабораторий типа только. А там.

1.2. Диагноз на бруцеллез у животных ставят на основании результатов бактериологического, серологического, молекулярно-генетического и аллергического исследований с учетом эпизоотологических данных и клинических признаков болезни, руководствуясь при этом санитарными и ветеринарными правилами по профилактике и борьбе с заразными болезнями, общими для человека и животных.
Молекулярно-генетическое исследование (ПЦР) проводят в случае аборта и при появлении у животных других клинических признаков, вызывающих подозрение на бруцеллез, а также при получении положительных и сомнительных результатов серологического исследования на бруцеллез животных, не иммунизированных противобруцеллезными вакцинами, из хозяйств, благополучных по данному заболеванию.
Молекулярно-генетическое исследование (ПЦР) проводят в случае аборта и при появлении у животных других клинических признаков, вызывающих подозрение на бруцеллез, а также при получении положительных и сомнительных результатов серологического исследования на бруцеллез животных, не иммунизированных противобруцеллезными вакцинами, из хозяйств, благополучных по данному заболеванию. (Я писала об этом ветврачам, им пофиг, они не руководствуются наставлением)

А тут, что не понятно? Я ж Вам уже пояснил, что в крови бруцелла находится только во время острой фазы — аборт и др. клинические признаки!!

Аннв М. wrote:
4.2.5. Диагностическая оценка реакции агглютинации

Реакцию считают положительной при наличии агглютинации с сывороткой крови крупного рогатого скота (буйволов, яков, зебу), верблюдов и лошадей, не иммунизированных или иммунизированных неагглютиногенными противобруцеллезными вакцинами (см. Прил. N 2, п.7), содержащей 200 ME антител и выше; овец и коз — 100 ME и выше; оленей (маралов) и собак — 50 ME и выше; пушных зверей и морских свинок — 10 ME и выше.

При выявлении среди не иммунизированных противобруцеллезными вакцинами, а также иммунизированных неагглютиногенными вакцинами крупного рогатого скота, верблюдов и лошадей, животных, реагирующих только в РА с содержанием антител 50-100 ME, а среди овец, коз, оленей (маралов), собак — 25 ME, считают сомнительно реагирующими и исследуют повторно через 15-30 сут. При повышении титров заболевание считают установленным. При сохранении титров на прежнем уровне проводят дополнительные исследования по дифференциации, согласно утвержденным методам.

При выявлении в стадах крупного рогатого скота, ранее иммунизированного против бруцеллеза агглютиногенными вакцинами (см. Прил. N 2, п.7), животных, реагирующих только в РА с содержанием не выше 200 ME антител и РСК в разведении сыворотки крови не выше 1:10, их повторно исследуют через 15-30 сут в РА, РСК и РИД. При повышении содержания антител в исследуемых сыворотках в РА и (или) РСК или положительной РИД заболевание считают установленным.
При выявлении в неблагополучных по бруцеллезу стадах крупного рогатого скота, ранее не иммунизированных или иммунизированных противобруцеллезными вакцинами, животных, положительно реагирующих в РА с содержанием 100 ME антител и выше, признают больными. Реакцию считают сомнительной при содержании 50 ME антител. Сыворотки крови от таких животных через 15-30 сут исследуют повторно. При получении вновь сомнительного результата животных признают больными бруцеллезом.

При исследовании в РА неиммунизированных баранов-производителей, козлов, пробников и ярок, содержащихся в благополучных по бруцеллезу отарах, где овцы (козы) иммунизированы против бруцеллеза, реакцию считают положительной, а заболевание установленным при содержании в сыворотке крови животных 100 ME антител и выше. Реакцию считают сомнительной при наличии 50 ME антител. Сыворотки крови от таких животных через 15-30 сут исследуют повторно. При получении вновь сомнительных результатов животных признают здоровыми, а отару — благополучной по бруцеллезу.

ВИдите, есть понятие положительное и больное. Под какой пункт подпадает мой случай и написано диагноз считают установленным? По реакции РА в благополучном хозяйстве нельзя поставить диагноз бруцеллез.

А что с такими животными делают?

Есть понятие сомнительное и положительное. А вот положительное=больное. Увы. По РА ставится всегда.

Аннв М. wrote:
5. МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БРУЦЕЛЛЕЗА

5.1. Тест-система предназначена для выявления ДНК бактерий рода Brucella (B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. ovis, B. canis) в биологическом материале от животных, не иммунизированных противобруцеллезными вакцинами, в случае аборта или проявления у них других признаков (бурситы, гигромы, орхиты, эпидидимиты), вызывающих подозрение на бруцеллез, и (или) при получении положительных и сомнительных результатов серологического исследования. (Ага, вуаля?)
5.2.3. Для исследования используют следующий патматериал:
— содержимое брюшной полости и желудка, селезенку, печень абортированного плода или весь плод;
— плаценту и плодовые оболочки от абортировавших животных;
— содержимое бурс, гигром;
кровь и молоко от абортировавших животных и (или) от животных, в сыворотке которых обнаружены агглютинины и (или) комплементсвязывающие антитела;
— сперму от самцов с признаками орхита и эпидидимита и (или) при получении сомнительных или положительных результатов аллергического или серологического исследования на бруцеллез или инфекционный эпидидимит баранов;
— в случае убоя животных для исследования отбирают парные лимфатические узлы подчелюстные, заглоточные, предлопаточные, надколенные, подколенные, надвыменные, парааортальные, тазовые и кусочки паренхиматозных органов (печень, селезенка); от самцов с признаками орхита или эпидидимита отбирают семенники с придатками.
5.6. Оценка результатов
При положительном результате ПЦР, зарегистрированном при исследовании хотя бы одной пробы материала, животное считают больным бруцеллезом.

Нигде не написано, что ПЦР является неинформативной.

А где я утверждал обратное? Она очень даже информативна. Но Вы еще раз внимательно прочтите, на чем она делается.

кровь и молоко от абортировавших

И еще, она информативна, только при положительном результате. Отрицательный, по указанным причинам, нет.

Зарегистрирован: 19/03/2014 14:43:40
Сообщений: 547
Оффлайн

Я не знаю каков механизм этого независимого анализа. К кому обратится? Что делать? Вот и предлагаю в качестве анализа взять патматериал во время родов, а они
Я ж не понимаю каков механизм этого всего.
Вот сюда и написала, может что подскажут.
Спасибо, за проявленный Вами интерес.

У вас, что частных ветклиник и других лабораторий нет? Паспорт там не спрашивают.

Зарегистрирован: 17/12/2015 08:41:34
Сообщений: 10
Оффлайн

Проблема не только в ветврачах, ближайшая лаборатория, поставившая диагноз в 500км, другая -филиал- отказалась, они поддерживают старших, 250 км. Другая ближайшая уже в 1200км. Я возила на ПЦР в Новосиб на самолете, влетело в 20тыс., куда пробы не пронесешь без гарантийного письма, на офиц. бланке. А сыворотку на серологию наши тогда отказались взять. А я, дурочка, думала все официально через них решить.

Вот что-то все так передергивают, дословно «кровь и молоко от абортировавших животных и (или) от животных, в сыворотке которых обнаружены агглютинины и (или) комплементсвязывающие антитела; »
Нигде ни в одной инструкции не написано, что животное положительно прореагировавшее в РА считается больным, кроме как в неблагополучном хозяйстве, где уже выделен возбудитель бруцеллеза или есть клин признаки.
Все документы достаточно вольно трактуются, а на вопрос покажите конкретный документ, никто ничего не может.

Ветинспекторы пока приостановили мои все документы, до выяснения всего ветврачами. Ограничения, естественно пока остаются. Как они сказали, что всего лишь надзорный орган, чтоб я и ветслужба выполнили свои обязанности.

Зарегистрирован: 19/03/2014 14:43:40
Сообщений: 547
Оффлайн

Проблема не только в ветврачах, ближайшая лаборатория, поставившая диагноз в 500км, другая -филиал- отказалась, они поддерживают старших, 250 км. Другая ближайшая уже в 1200км. Я возила на ПЦР в Новосиб на самолете, влетело в 20тыс., куда пробы не пронесешь без гарантийного письма, на офиц. бланке. А сыворотку на серологию наши тогда отказались взять. А я, дурочка, думала все официально через них решить.

Вот что-то все так передергивают, дословно «кровь и молоко от абортировавших животных и (или) от животных, в сыворотке которых обнаружены агглютинины и (или) комплементсвязывающие антитела; »
Нигде ни в одной инструкции не написано, что животное положительно прореагировавшее в РА считается больным, кроме как в неблагополучном хозяйстве, где уже выделен возбудитель бруцеллеза или есть клин признаки.
Все документы достаточно вольно трактуются, а на вопрос покажите конкретный документ, никто ничего не может.

Ветинспекторы пока приостановили мои все документы, до выяснения всего ветврачами. Ограничения, естественно пока остаются. Как они сказали, что всего лишь надзорный орган, чтоб я и ветслужба выполнили свои обязанности.

Запомните, к сожалению, Вы одни со своим горем. Им всем глубоко наср. Они не понимают весь ужас, шок и растерянность, которую испытывают люди, случайно, впервые столкнувшиеся со страшным диагнозом. И никогда не сталкивавшиеся с этой системой! Вам повезло, что они еще и не все стадо захотели умертвить, включая хозяев. А общаться с Вами они будут так, как будто это Вы специально заразили и собираетесь еще и весь регион! Они не понимают, что Вы потерпевшие. Еще и штраф на вас попытаются наложить.
Они будут действовать в соответствии с инструкциями по оздоровлению очага. И защищать свои тохес. К сожалению, все это переписанное с предыдущего старья. Ничего нового, в нашей стране, за последние 25 лет не придумали. Придумка — требует вложений в науку. А это очень много денег при очень не близком результате. А у нас все надо здесь и сейчас. Поэтому, по старинке, считают, что лучше все уничтожить и точка! Это ж еще и дешевле. И зарубежный опыт не нужен, он не соответствует действующему законодательству. Они еще, при любых раскладах, к вам с дезинфекцией придут. Не мытьем, так катаньем.
Ошибка — сразу со своей стороны все делать официально. Инструкции — против этого. Но, надо признать, что мелитензис — это действительно опасно!
Расстояния впечатляют. Но, повторю, если Вы уверены в правоте и чистоте — требуйте. Резко взять и нагнуть Вас без суда и полиции они не смогут. Частная собственность, однака! Как ни смешно.
Про трактовки — какое законодательство, такие и трактовки. Но, фиг с ним, с законодательством, посмотрите просто про биологию болячки. И примите решение. Ошибки в лабораториях бывают. Но, меня смущает титр.
Мы, в нашей ситуации (она немного другая была) просмотрели все, даже с Аргентиной связались (штаты и европа само собой) и потом приняли решение. И победили.

Это сообщение было редактировано 1 раз. Последнее обновление произошло в 17/12/2015 22:04:00

источник

Выявление возбудителей бруцеллёза (Brucella spp), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции определяется генетический материал (ДНК) микроорганизма в моче, синовиальной жидкости, грудном молоке или образце ткани.

Бруцелла, возбудитель бруцеллёза, ундулирующей лихорадки, септицемии Брюса.

Синонимы английские

Brucella spp, DNA [Polymerase chain reaction] (urine, synovial fluid, breast milk, tissue sample), B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. canis.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Биоптат, грудное молоко, первую порцию утренней мочи, синовиальную жидкость.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Общая информация об исследовании

Brucella spp – это грамотрицательные аэробные коккобациллы, являющиеся внутриклеточными паразитами человека и животных и вызывающие бруцеллёз. Они попадают в организм при употреблении сырого козьего молока и при непосредственном контакте с инфицированными тканями животных (как у ветеринаров, работников мясной промышленности, сотрудников микробиологических лабораторий). Наибольшее значение в клинике инфекционных болезней человека имеет 4 вида Brucella: B. melitensis, B. abortus, B. suis и B. canis, при этом на долю B. melitensis приходится подавляющее большинство случаев заражения. Бруцеллёз, вызванный различными видами Brucella, протекает и лечится одинаково, поэтому с клинической точки зрения нет необходимости определять видовую принадлежность возбудителя.

Бруцеллёз представляет собой системный инфекционный процесс, при котором поражаются практически все органы. Наиболее часто микроорганизм удаётся обнаружить в крови, однако другие биологические среды (моча, синовиальная жидкость) и фрагменты тканей (биоптат) также могут быть использованы для диагностики бруцеллёза. Несмотря на то что бруцеллёз считается зоонозной инфекцией, описаны случаи передачи микроорганизма от человека к человеку, в том числе случаи заражения младенцев при употреблении грудного молока больной матери. Его могут исследовать на бруцеллёз, чтобы установить источник заражения и не допустить реинфекции.

Диагностика бруцеллёза – достаточно сложная задача. Заболевание не имеет каких-либо специфических признаков, а также может протекать в бессимптомной, хронической и локализованной форме. Поэтому диагностика основана на лабораторном выявлении микроорганизма. Существует несколько способов идентификации Brucella: посев на питательную среду, серологические методы и исследование с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). ПЦР – это метод молекулярной диагностики, позволяющий обнаруживать в биологическом материале (например, в моче) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Для диагностики бруцеллёза исследование с помощью ПЦР используют сравнительно недавно, однако, благодаря его преимуществам, метод находит всё большее применение в клинической практике.

Около 20-40 % случаев бруцеллёза – это локализованные формы заболевания, характеризующиеся изолированным поражением какого-либо органа, наиболее часто это орган мочеполовой, нервной системы, сердце, а также поражение сустава. Как правило, локализованный бруцеллёз – это последствие нераспознанной ранее остросептической формы. Чувствительность бактериологического метода («золотого стандарта» идентификации Brucella) при исследовании большинства биологических жидкостей не превышает 40 %. В такой ситуации ПЦР является хорошей альтернативой посеву на питательную среду: её чувствительность составляет 97-98 %. В некоторых случаях положительный результат исследования с помощью ПЦР может оказаться достаточным диагностическим критерием даже при отрицательном результате бактериологического посева и серологических тестов.

ПЦР основана на выявлении уникального для представителей рода Brucella фрагмента ДНК (гена bcsp31) и поэтому характеризуется очень высокой специфичностью. Для сравнения: большинство серологических методов выявляют антитела к общему для многих микроорганизмов липоолигосахариду, и их результаты могут быть ложноположительными при наличии инфекции Yersinia enterocolitica O:9, Salmonella urbana group N, Francisellatularensis, EscherichiacoliO:157, Stenotrophomonas maltophilia и некоторых других микроорганизмов.

Благодаря высокой специфичности положительный результат исследования с помощью ПЦР у пациента с признаками заболевания позволяет подтвердить диагноз. С другой стороны, случайно выявленный положительный результат у пациента без каких-либо жалоб и симптомов требует дальнейшего, более полного клинического и лабораторного обследования.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики остросептической, хронической и локализованных форм бруцеллёза, а также рецидива заболевания.

Когда назначается исследование?

  • При симптомах бруцеллёза (остросептической формы): высокой лихорадке с температурой 39-40 °С и выше (особенно при колебаниях температуры), ознобе, потливости, слабости, миалгии, артралгии или артрите.
  • При обследовании пациента с изолированным поражением мочеполовой системы и суставов при наличии в анамнезе указаний на употребление сырого козьего молока, особенно в эндемичных по бруцеллёзу районах, и профессиональных особенностей (как у ветеринаров, работников молочной и мясной промышленности).
  • При подозрении на бруцеллёз у новорождённого.

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

  • бруцеллёз;
  • туберкулёз с поражением костно-суставной системы.

Причины отрицательного результата:

  • отсутствие бруцеллёза;
  • неправильное взятие биоматериала на исследование.

Что может влиять на результат?

  • Туберкулёз костно-суставной системы может приводить к ложноположительному результату.
  • Применение доксициклина, рифампицина, ципрофлоксацина и других фторхинолонов способствует ложноотрицательному результату.
  • Результат исследования следует оценивать с учётом дополнительных анамнестических, лабораторных и инструментальных данных.

Кто назначает исследование?

Инфекционист, уролог, хирург, невролог, врач общей практики.

  • Al Dahouk S, Nöckler K. Implications of laboratory diagnosis on brucellosis therapy. Expert Rev Anti Infect Ther. 2011 Jul;9(7):833-45.
  • Yu WL, Nielsen K. Review of detection of Brucella spp. by polymerase chain reaction. Croat Med J. 2010 Aug;51(4):306-13. Review.
  • Morata P, Queipo-Ortuño MI, Reguera JM, Miralles F, Lopez-Gonzalez JJ, Colmenero JD. Diagnostic yield of a PCR assay in focal complications of brucellosis. J Clin Microbiol. 2001 Oct;39(10):3743-6.
  • Nimri LF. Diagnosis of recent and relapsed cases of human brucellosis by PCR assay. BMC Infect Dis. 2003 Apr 28;3:5.

Оставьте ваш E-mail и получайте новости, а также эксклюзивные предложения от лаборатории KDLmed

источник

РЦРЗ (Республиканский центр развития здравоохранения МЗ РК)
Версия: Клинические протоколы МЗ РК — 2018

Одобрен
Объединенной комиссией по качеству медицинских услуг
Министерства здравоохранения Республики Казахстан
от «29» марта 2019 года
Протокол №60

Бруцеллёз – зоонозное инфекционно-аллергическое заболевание, вызываемое бактериями рода Brucella, протекающее в латентной, острой и хронической формах. Острые формы протекают по типу токсико-бактериемической инфекции. Хронические формы характеризуются выраженным полиморфизмом с преимущественным поражением опорно-двигательной, нервной, мочеполовой и др. систем; склонностью к рецидивирующему течению с развитием инвалидизирующих последствий.

Название протокола: Бруцеллез

Зарегистрирован: 17/12/2015 08:41:34
Сообщений: 10
Оффлайн

Добрый день!
Опишу ситуацию.
Содержу коз в количестве 15гол, на участке, безвыпасно, траву не кошу, животные только на сене, контактов у моих животных с другими МРС не было, мои животные доступ за пределы участка не имеют. При проведении планового исследования на бруцеллез в 2014г все результаты отрицательные, после этого ввоза животных в мое хозяйство не было.
Весной 2015 года планового исследования не было, а провели его в октябре 2015г(возможно это был эпизоотический мониторинг) При этом в нашем населенном пункте выявлено четыре положительнореагирующих животных МРС. В том числе мое животное, козочка, рожденная в моем хозяйстве в 2014 г. Мать ее отр, козел, ее крывший — отр, пятеро коз, живших с ней в одной стайке на протяжении более 1 года, — отр. Результаты РА 1:200, Рид положит. Мы с муже уже тоже сдали на бруцеллез — отриц.
В нашей местности до этого ни разу за обозримые года не было выявлено ни одного случая заболевания бруцеллезом.
Козочка на момент исследования была беременна со сроком 2 мес. Помимо этого до беременности была обезрожена, но пошло инфицирование пазух, после проведения антибиотикотерапии состояние улучшилось. Но возможно очаг инфекции в пазухах остался., так как коза опять стала пугливой и голову трогать не дает.
После выявления, козочка была изолирована. Все оставшееся поголовье повторно исследовано, все отрицательно, вчера сделали уже второй забор крови.
Провести повторное исследование положительно среагировавщего животного мне отказали. Выписали предписание на убой.
Я за свои средства провела исследование цельной крови в ПЦР, результат отрицательный.
Имели ли право мне отказать в повторном исследовании животного? При этом, диагноз установила лаборатория. Никто из врачей не выезжал в мое хозяйство, не проводил исследование ситуации. Все мои попытки провести повторное исследование встретили категорический отказ. Более того передать всю ругань, что я услышала в свой адрес, невозможно, врач эпизоотолог совершенно неадекватна.

Других положительно реагирующих животных уже забили, вскрытие ветсанэкспертом никаких изменений не выявило, пат материал на исследование, естесственно, никто не отправлял. При этом все замалчивается, скрывается, никто ничего не знает. Даже о том, что пришли результаты повторных анализов мне не сообщили.

Может ли это быть ложноположительная реакция в связи с беременностью, с воспалительным процессом?

Какие действия мне можно предпринять для установления диагноза?

Зарегистрирован: 17/12/2015 08:41:34
Сообщений: 10
Оффлайн

И для чего то пишут такие рекомендации

МИНИСТЕРСТВО
СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА
И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РСФСР

ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА БРУЦЕЛЛЕЗА
И ИЕРСИНИОЗА И МЕРЫ ПО ИХ ПРОФИЛАКТИКЕ.
РЕКОМЕНДАЦИИ.

При проведении плановых диагностических исследований животных на
бруцеллез в благополучных по этой болезни зонах обычно применяют реакцию
агглютинации (РА) или Роз бенгал пробу (РБП). При этом, особенно в весеннее
время, при исследовании сыворотки крови отдельных незараженных и не вакциро-
ванных против бруцеллеза животных с бруцеллезными антигенами могут быть
получены неспецифические результаты реакций.
Обычно появление таких реакций
обусловлено глубокой беременностью, стрессами, прививками против других болезней
или носительством близкородственных в антигенном отношении грамотрицательных
микроорганизмов (пастерелл, сальмонелл, кампилобактерий,иерсиний и др.), а также
рядом других причин.
Как правило, уровень выявляемых при этом агглютининов не
превышает 100 МЕ у свиней и овец и 200 МЕ у крупного рогатого скота, за исключением
случаев, когда животные являются носителям микроорганизмов из группы иерсиний,
в частности иерсинии энтероколитика серовара 0:9.
Оценка подобных показаний РА в ранее благополучных по бруцеллезу хозяйстах,
учитывая возможность заноса инфекции и длительного бессимптомного
болезни, затруднена и требует дополнительной расшифровки. В этих целях рекомендуется
использовать комплекс показателей, предусмотренных Инструкцией
о мероприятиях по
профилактике и ликвидации бруцеллеза животных, утвержденной бывшим Главным
управлением ветеринарии Госагропрома СССР 10.11.88 г., в том числе:
эпизоотологические данные, проявление клинических признаков болезни, сроки
иммунизации против других болезней, результаты исследований другими методами
(бактериологическим, РДСК, РСК, реакцией аллергии) и повторного (через 15-20 дней)
исследования сывороток крови этих и остальных животных данного стада (отары).
Практический опыт показыват, что комплекс дополнительных исследований в
большинстве случаев позволяет подтвердить или исключить наличие бруцеллезной
инфекции в хозяйстве (на ферме). Однако при этом нередко требуются значительные
затраты рабочей силы, времени и материальных средств на проведение ограничительных
мероприятий и для окончательного уточнения диагноза. В связи с этим быстрое
выявление и искоренение возникшего очага бруцеллезной инфекции, а также недопущение
неоправданного убоя скомпрометированных групп скота при выявлении гетероспецифических
серологических реакций с бруцеллезными диагностикумам
и имеют большую эпизоотологическую
и экономическую значимость.

Я, правда, на вашей стороне.
Но обращу Ваше внимание на следующее.
Ветеринары правы, инструкция есть уже давно другая. Можете посмотреть ее на этом же сайте http://www.fsvps.ru/fsvps/laws/168.html#5

Повторные анализы проводятся при получении условно-положительного результата (сомнительного). Да и в «рекомендациях», которые Вы приводите, указано, что титр не должен превышать 1:100. А у Вас 1:200. Это много, для возможной ошибки.
Криворуких в лабораториях много, но не все же?
Вы можете обратиться лично в любую другую лабораторию и сделать у них независимый анализ (РА, РИД). Втихаря. Никто запретить не сможет. Если ничего не случится.
Что касается околоплодных вод и т.п., то тут, мне видится так: если коза больна, то родов не будет. Будет аборт. А если родит, то — здорова. Плоды и прочее, по условиям карантина Вы никуда вывезти не сможете. Это уже подсудное дело.
Почему перестраховка? Почитайте внимательно про энту болячку, встаньте на их место и ответьте — будете ли вы рисковать своим (и чужим) здоровьем и работой ради какой-то чужой козы? Или даже не ради козы, а просто?

Что касается источника болезни, то тут много путей. Я ж не знаю всей истории Вашей козы и стада. Кто крыл, кто роги пилил и чем. Вам должно быть видней. Но, как правило, когда садишься и спокойно анализируешь, находится причина, о которой даже подумать бывает странно. Увы. Ну не спроста ж Вы не единственный случай оказался.

Да, на всякий случай, есть еще Наставления по бруцеллезу от 2003 года (вроде). Там ПЦР считается абсолютно достоверной при однократном исследовании. Правда, есть оговорка, что ее используют для уточнения серологии. И, опять же, не по крови! Хотя, вру, там кажется не уточняется.

А в целом так — если Вы абсолютно уверены, что коза здорова, то делайте независимый анализ. Если будет отрицательным — то бейтесь с управлением.

Это сообщение было редактировано 1 раз. Последнее обновление произошло в 17/12/2015 15:34:25

Наверное,я сделаю запрос в Департамент ветеринарии, о том какие нормативные документы действительны. Если инструкция недействительна, почему ее мне зачитывал заместитель в департаменте ветеринарии?
Чтоб не быть голословной и не основываться на том, чего нет.
А бак исследования делают во всех лаборатория, сколько обзвонила, никто не отказал.
Не имею права самостоятельно взять, кровь должен брать вет врач, составить сопроводительную., подтвердить этим, что взято от конкретного животного. Может я совсем от другого могу взять. Это типа защита от подлога.

Они от забитых животных патматериал не взяли, не то что ПЦР сделали.

А про Наставление они вообще слышать не хотят, это для лабораторий типа только. А там.

1.2. Диагноз на бруцеллез у животных ставят на основании результатов бактериологического, серологического, молекулярно-генетического и аллергического исследований с учетом эпизоотологических данных и клинических признаков болезни, руководствуясь при этом санитарными и ветеринарными правилами по профилактике и борьбе с заразными болезнями, общими для человека и животных.
Молекулярно-генетическое исследование (ПЦР) проводят в случае аборта и при появлении у животных других клинических признаков, вызывающих подозрение на бруцеллез, а также при получении положительных и сомнительных результатов серологического исследования на бруцеллез животных, не иммунизированных противобруцеллезными вакцинами, из хозяйств, благополучных по данному заболеванию.
Молекулярно-генетическое исследование (ПЦР) проводят в случае аборта и при появлении у животных других клинических признаков, вызывающих подозрение на бруцеллез, а также при получении положительных и сомнительных результатов серологического исследования на бруцеллез животных, не иммунизированных противобруцеллезными вакцинами, из хозяйств, благополучных по данному заболеванию. (Я писала об этом ветврачам, им пофиг, они не руководствуются наставлением)

4.2.5. Диагностическая оценка реакции агглютинации

Реакцию считают положительной при наличии агглютинации с сывороткой крови крупного рогатого скота (буйволов, яков, зебу), верблюдов и лошадей, не иммунизированных или иммунизированных неагглютиногенными противобруцеллезными вакцинами (см. Прил. N 2, п.7), содержащей 200 ME антител и выше; овец и коз — 100 ME и выше; оленей (маралов) и собак — 50 ME и выше; пушных зверей и морских свинок — 10 ME и выше.

При выявлении среди не иммунизированных противобруцеллезными вакцинами, а также иммунизированных неагглютиногенными вакцинами крупного рогатого скота, верблюдов и лошадей, животных, реагирующих только в РА с содержанием антител 50-100 ME, а среди овец, коз, оленей (маралов), собак — 25 ME, считают сомнительно реагирующими и исследуют повторно через 15-30 сут. При повышении титров заболевание считают установленным. При сохранении титров на прежнем уровне проводят дополнительные исследования по дифференциации, согласно утвержденным методам.

При выявлении в стадах крупного рогатого скота, ранее иммунизированного против бруцеллеза агглютиногенными вакцинами (см. Прил. N 2, п.7), животных, реагирующих только в РА с содержанием не выше 200 ME антител и РСК в разведении сыворотки крови не выше 1:10, их повторно исследуют через 15-30 сут в РА, РСК и РИД. При повышении содержания антител в исследуемых сыворотках в РА и (или) РСК или положительной РИД заболевание считают установленным.
При выявлении в неблагополучных по бруцеллезу стадах крупного рогатого скота, ранее не иммунизированных или иммунизированных противобруцеллезными вакцинами, животных, положительно реагирующих в РА с содержанием 100 ME антител и выше, признают больными. Реакцию считают сомнительной при содержании 50 ME антител. Сыворотки крови от таких животных через 15-30 сут исследуют повторно. При получении вновь сомнительного результата животных признают больными бруцеллезом.

При исследовании в РА неиммунизированных баранов-производителей, козлов, пробников и ярок, содержащихся в благополучных по бруцеллезу отарах, где овцы (козы) иммунизированы против бруцеллеза, реакцию считают положительной, а заболевание установленным при содержании в сыворотке крови животных 100 ME антител и выше. Реакцию считают сомнительной при наличии 50 ME антител. Сыворотки крови от таких животных через 15-30 сут исследуют повторно. При получении вновь сомнительных результатов животных признают здоровыми, а отару — благополучной по бруцеллезу.

ВИдите, есть понятие положительное и больное. Под какой пункт подпадает мой случай и написано диагноз считают установленным? По реакции РА в благополучном хозяйстве нельзя поставить диагноз бруцеллез.

А что с такими животными делают?

5. МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БРУЦЕЛЛЕЗА

5.1. Тест-система предназначена для выявления ДНК бактерий рода Brucella (B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. ovis, B. canis) в биологическом материале от животных, не иммунизированных противобруцеллезными вакцинами, в случае аборта или проявления у них других признаков (бурситы, гигромы, орхиты, эпидидимиты), вызывающих подозрение на бруцеллез, и (или) при получении положительных и сомнительных результатов серологического исследования. (Ага, вуаля?)
5.2.3. Для исследования используют следующий патматериал:
— содержимое брюшной полости и желудка, селезенку, печень абортированного плода или весь плод;
— плаценту и плодовые оболочки от абортировавших животных;
— содержимое бурс, гигром;
кровь и молоко от абортировавших животных и (или) от животных, в сыворотке которых обнаружены агглютинины и (или) комплементсвязывающие антитела;
— сперму от самцов с признаками орхита и эпидидимита и (или) при получении сомнительных или положительных результатов аллергического или серологического исследования на бруцеллез или инфекционный эпидидимит баранов;
— в случае убоя животных для исследования отбирают парные лимфатические узлы подчелюстные, заглоточные, предлопаточные, надколенные, подколенные, надвыменные, парааортальные, тазовые и кусочки паренхиматозных органов (печень, селезенка); от самцов с признаками орхита или эпидидимита отбирают семенники с придатками.
5.6. Оценка результатов
При положительном результате ПЦР, зарегистрированном при исследовании хотя бы одной пробы материала, животное считают больным бруцеллезом.

Нигде не написано, что ПЦР является неинформативной.

Код Название
А23 Бруцеллез
А23.0 Бруцеллез, вызванный Brucella melitensis
А23.1 Бруцеллез, вызванный Brucella abortus
A23.2 Бруцеллез, вызванный Brucella suis
A23.3 Бруцеллез, вызванный Brucella canis
A23.8 Другие формы бруцеллеза
A23.9 Бруцеллез неуточненный

Дата разработки/пересмотра протокола: 2015 год (пересмотр 2018 г.)

Сокращения, используемые в протоколе:

суточная доза
IgG иммуноглобулины класса G
IgM иммуноглобулины класса М
IgА иммуноглобулины класса А
per os перорально (внутрь)
АЛТ аланинаминотрансфераза
АСТ аспартатаминотрансфераза
ВНС вегетативная нервная система
ВОЗ Всемирная организация здравоохранения
ИФА иммуноферментный анализ
НПВП нестероидные противовоспалительные препараты
ОАК общий анализ крови
ОАМ общий анализ мочи
ОНМК острое нарушение мозгового кровообращения
ПНС периферическая нервная система
ПЦР полимеразная цепная реакция
РА реакция агглютинации Райта
РБТ
РХ

Роз Бенгал проба
реакция агглютинации пластинчатая Хеддльсона
РФ
СМЖ
ревматоидный фактор
спинномозговая жидкость
ССС сердечно-сосудистая система
ТМП-СМЗ триметоприм- сульфаметоксазол
УЗДГ ультразвуковая доплерография
УЗИ ультразвуковое исследование
ЦНС центральная нервная система

Пользователи протокола: инфекционисты, терапевты, врачи общей практики, терапевты, акушер-гинекологи, невропатологи, урологи, ревматологи, клинические фармакологи.

Категория пациентов: взрослые, в том числе беременные.

Шкала уровня доказательности:

А Высококачественный мета-анализ, систематический обзор РКИ или крупное РКИ с очень низкой вероятностью (++) систематической ошибки, результаты которых могут быть распространены на соответствующую популяцию.
В Высококачественный (++) систематический обзор когортных или исследований случай-контроль или высококачественное (++) когортных или исследований случай-контроль с очень низким риском систематической ошибки или РКИ с невысоким (+) риском систематической ошибки, результаты которых могут быть распространены на соответствующую популяцию.
С Когортное или исследование случай-контроль или контролируемое исследование без рандомизации с невысоким риском систематической ошибки (+), результаты которых могут быть распространены на соответствующую популяцию или РКИ с очень низким или невысоким риском систематической ошибки (++ или +), результаты которых не могут быть непосредственно распространены на соответствующую популяцию.
D Описание серии случаев или неконтролируемое исследование или мнение экспертов.
GPP Наилучшая клиническая практика.
Клиническая форма Степень тяжести
и стадия компенсации
инфекционного процесса
Органопатология
(очаговые проявления)
Латентный бруцеллез (субклиническая форма, положительно реагирующие по серо- и/или аллергическим реакциям)
Острый бруцеллез (длительность болезни до 3 месяцев)
  • Легкое течение
  • Среднетяжелое течение
  • Тяжелое течение
Опорно-двигательный аппарат: артрит, пери- и параартрит, сакроилеит, остеоартрит, артроз, спондилоартрит, спондилит, спондилодисцит, спондилез, бурсит, тендовагинит, фиброзит, периостит, перихондрит, остеохондроз и т.д.
Нервная система
ЦНС: менингит, энцефалит, миелит, васкулит сосудов головного мозга, вертебро-базилярная недостаточность, гипертензионный, диэнцефальный, гипоталамический синдромы и т.д.
ПНС: неврит, радикулит, плексит, солярит, корешковый синдром и т.д.
ВНС: вегето-сосудистая дистония, метеочувствительность, нарушения микроцикуляции, атония кишечника и т.д.
Психобруцеллез:
астеноневротический синдром, депрессивный синдром,
галлюциноз и т.д.
Органы чувств: невриты зрительного и слухового нерва, увеит, увеонейрохориоретинит и т.д.
ССС: миокардит, перикардит, эндокардит, нарушения ритма и проводимости, миокардиодистрофия, флебит,тромбофлебит и т.д.
Половая система: орхит, орхоэпидидимит, сальпингооофорит, нарушения менструального цикла, бесплодие и т.д.
Мочевыделительная система: гломерулонефрит и др.
Дыхательная система: бронхит, пневмония – редко.
Пищеварительная система: гепатит, холецистит, гастрит – редко
Подострый бруцеллез (длительность болезни от 3 до 6 месяцев)
Хронический бруцеллез (длительность болезни свыше 6 мес.):
Первично-хроническийбруцеллез (отсутствие острой фазы при хроническом течении болезни);
Вторично-хронический бруцеллез (следующая после острого и\или подострого бруцеллеза стадия болезни)
  • Компенсация

(трудоспособность сохранена)

  • Субкомпенсация

(трудоспособность снижена)

  • Декомпенсация

(трудоспособность утеряна)

Остаточные явленияперенесенного бруцеллеза (наличие дегенеративно-дистрофических изменений в тканях при отсутствии в организме возбудителя)
Повторный бруцеллез (с указанием формы):
суперинфекция – повторное заражение на фоне продолжающегося инфекционного процесса;
реинфекция – повторное заражение после завершения предшествующего инфекционного процесса
В зависимости от клинической формы
  • Острый бруцеллез
  • Подострый бруцеллез
  • Вторично-хронический бруцеллез
  • Первично-хронический бруцеллез

Бруцеллёз человека – это системная инфекция, вовлекающая в патологический процесс многие органы и ткани (см. «Органопатология»).

Острый бруцеллез (длительность заболевания до 3 месяцев) протекает по типу токсико-бактериемиемической инфекции, характеризуется ремиттирующей лихорадкой с ознобами и потами, полимикролимфаденопатией, гепато/гепатоспленомегалией, полиартронейромиалгиями.

Подострый бруцеллез (длительность заболевания от 3 до 6 месяцев) – следующая за острым бруцеллезом стадия болезни, характеризуется появлением очагового поражения органов и систем инфекционно-аллергического и септико-метастатического характера на фоне клинических проявлений бактериемической инфекции (лихорадка, ознобы, поты, лимфаденопатия, гепатоспленомегалия).
При развитии острого бруцеллеза на сенсибилизированном фоне (в эндемичном регионе) отмечается раннее вовлечение в патологический процесс (в сроке до 3 месяцев) преимущественно опорно-двигательной, нервной, половой и других систем с развитием воспалительного процесса инфекционно-аллергического (быстро проходящего «летучего») и септико-метастатического характера (более длительного) [1].

Вторично-хронический бруцеллез (длительность заболевания свыше 6 месяцев), следующая стадия за острым и/или подострым бруцеллезом, характеризуется появлением или обострением воспалительных процессов в пораженных органах. Признаки токсикобактериемической инфекции (лихорадка, ознобы, поты, лимфаденопатия, гепатоспленомегалия) могут быть умеренными или отсутствовать. Критерий постановки диагноза: наличие острой/подострой стадии в анамнезе, подтвержденной лабораторными методами.

Первично-хронический бруцеллез (длительность заболевания свыше 6 месяцев), характеризуется вялым торпидным течением в виде воспалительных процессов в пораженных органах. Признаки токсикобактериемической инфекции (лихорадка, ознобы, поты, лимфаденопатия, гепатоспленомегалия) могут быть умеренными или отсутствовать. Критерий постановки диагноза: отсутствие острой/подострой стадии в анамнезе, подтвержденной лабораторными методами.
В эндемичном регионе в связи нестойкостью и непрочностью иммунитета люди подвергаются супер- и реинфицированию. Поэтому целесообразно выделять форму заболевания — Повторный бруцеллез: суперинфекция – повторное заражение на фоне продолжающегося инфекционного процесса; реинфекция – повторное заражение после завершения предшествующего инфекционного процесса. Повторный бруцеллез может протекать в острой, подострой, первично- и вторично-хронической формах (соответственно определению).
В эндемичных очагах бруцеллеза чаще встречаются латентные и первично-хронические формы бруцеллеза.

Примерная формулировка диагноза [2]:
— Острый бруцеллез, среднетяжелое течение. Полиартралгия. (РА-1:800, РХ-резко положительная).
— Острый бруцеллез, среднетяжелое течение. Артрит левого коленного сустава. Бурсит правого локтевого сустава (РА-1:400, РХ-положительная, ИФА IgM – положительные).
— Острый бруцеллез, тяжелое течение. Суперинфекция на фоне первично-хронического бруцеллеза. Двухсторонний сакроилеит. Остеохондроз пояснично-крестцового отдела позвоночника. Артроз правого коленного сустава (РА-1:200, РХ-положительная, ИФА IgG – положительные).
— Подострый бруцеллез, тяжелое течение. Серозный менингит (ПЦР Brucella spp.)
-Первично-хронический бруцеллез. Субкомпенсация. Артроз коленных, голеностопных суставов. Остеохондроз пояснично-крестцового отдела позвоночника, корешковый синдром (РА-1:100, РХ-положительная, Роз-Бенгал тест – положительный).
-Вторично-хронический бруцеллез. Декомпенсация. Спондилит L2, L3, осложненный превертабральным натечником. Корешковый синдром. Артрозо-артрит пястно-фаланговых суставов. (РА-1:200, РХ-положительная, Роз-Бенгал тест – положительный).
-Подострый бруцеллез, тяжелое течение. Реинфекция. Менингоэнцефаломиелит. (РА-1:200, РХ-положительная, ИФА IgG – положительные).
При каждой форме следует обязательно указать подтверждающие лабораторные тесты, органопатологию, при острой/подострой формах – тяжесть течения, при хронических формах – стадию компенсации.

МЕТОДЫ, ПОДХОДЫ И ПРОЦЕДУРЫ ДИАГНОСТИКИ

Диагностические критерии

Жалобы:
Острый/подострый бруцеллез:
— повышение температуры (чаще во второй половине дня), озноб, потливость (чаще ночная при снижении температуры; иногда профузная, требующая смены нательного и постельного белья);
-боли костно-суставные, нервно-мышечные, в пояснице (полиартронейромиалгии «летучего» характера, «ломота» в теле);
-отечность, покраснение и ограничение движений в области пораженных суставов;
-слабость, повышенная утомляемость, снижение работоспособности;
-головная боль;
-метеочувствительность
Первично-и вторично-хронический бруцеллез:
-температура субфебрильная (при активности инфекционного процесса) и нормальная (при отсутствии активности);
-боли костно-суставные, нервно-мышечные, боли в пояснице (более стойкого характера);
— ограничение активных и пассивных движений; хруст в пораженных суставах;
— слабость, повышенная утомляемость, снижение работоспособности;
— головная боль, головокружение (нейробруцеллез);
— метеочувствительность;
— раздражительность, плаксивость, быстрая смена настроения, обилие жалоб;
— снижение памяти;
— нарушения менструального цикла, потенции.

Анамнез:
Острый/подострый бруцеллез:
— острое начало с озноба и повышения температуры во второй половине дня и последующим потоотделением (ночью) при её снижении;
— относительно удовлетворительное самочувствие в начале заболевания;
— присоединение интоксикации (головная боль, слабость, снижение веса) при длительности заболевания более 2-3 недель;
Первично-и вторично-хронический бруцеллез:
— связь обострения процесса с воздействием неблагоприятных факторов (переохлаждение, перегревание, повышенные физические и умственные нагрузки, инсоляция, посещение саун, получение физиопроцедур с термическим действием, беременность, роды, присоединение интеркуррентных заболеваний, стрессы, недостаточное белковое питание и т.д.).

Эпидемиологический анамнез:
— участие в окотной кампании;
— уход за животными (мелкий и крупный рогатый скот);
— забой животных и разделка туш, потрошение кишок;
— контакт с сырым мясом, фаршем, внутренними органами животных (печень, почки, легкие, лимфатические узлы, кишки и т.д.);
— употребление сырого молока или молочных продуктов кустарного производства, прошедших термическую обработку менее 100С с короткой экспозицией (сливки, сметана, брынза, творог);
— употребление недостаточно термически обработанного мяса (шашлык, донер, шаурма, самса с мясом и т.д.);
— обработка шкур животных, пошив изделий из шкур (каракуль, каракульча);
— стрижка овец;
— работа с шерстью животных, первичная обработка, вычесывание пуха и т.д.;
— уборка и проведение ремонтных работ в помещениях для животных;
— производство мясокостной муки;
— работа на мясокомбинате, мясных рынках;
— работа на молочных фермах, заводах;
— профессия (доярка, чабан, ветеринар, лабораторный работник, работающий с живыми культурами бруцелл и с кровью)
— работа поваром, шашлычником;
— проживание в гиперэндемичных регионах по бруцеллезу (Жамбылская, Кызылординская, Южно-Казахстанская, Алматинская области);
— пребывание (питание) в эндемичных регионах за пределами республики (Турция, Кавказ, Кыргызстан и др.)
-эпидемиологическая связь с известной вспышкой бруцеллеза или подтвержденным случаем бруцеллеза у людей
— пересадка пациентам органов от доноров, перенесших бруцеллез

Физикальное обследование:
Острый/подострый бруцеллез
— в период озноба: бледность лица, кожные покровы конечностей холодные на ощупь;
— в период лихорадки: гиперемия лица, горячая кожа, тахикардия, гипотония;
— в период апирексии: общий и локальный (ладоней и стоп) гипергидроз;
— увеличение печени;
— полимикроаденопатия: пальпируются все группы лимфатических узлов, мелкие (размером с фасоль, горошину), безболезненные;
— увеличение селезенки ( в 30% случаев);
При тяжелом течении болезни:
— упорная головная боль (при менингите бруцеллезной этиологии);
— поражение черепно-мозговых нервов (при развитии энцефалита).
При развитии острого бруцеллеза (ре- и суперинфекции) на фоне хронического бруцеллеза возможно развитие органопатологии (см.классификацию):
— боли, отек, гиперемия, локальная гипертермия, ограничение движений в пораженных суставах (чаще крупных, но могут во всех без исключения вплоть до височно-челюстного, межпозвоночных, межфаланговых и т.д.), сочленениях (крестцово-подвздошном, ключично-акромиальном и др.), позвоночнике (спондилодисциты, спондилиты, спондилоартриты);
— боли, отек, гиперемия, местная гипертермия яичек и его придатков (одно-или двухстороннее).

Первично-и вторично-хронический бруцеллез:
общий или локальный (ладони, стопы) гипергидроз;
— микрополилимфаденопатия (пальпируются все группы лимфатических узлов мелкие, плотные, безболезненные);
— гепатоспленомегалия (при активности инфекционного процесса);
— положительные менингеальные симптомы (бруцеллезный менингит)
— поражения черепно-мозговых нервов, нарушения сознания (бруцеллезный менингоэнцефалит)
— двигательные расстройства, нарушения функции тазовых органов (бруцеллезный миелит)
— болезненная пальпация паравертебральных точек (остеохондроз позвоночника)
— положительные симптомы натяжения Ласега (корешковый синдром);
— болезненность по ходу нервных стволов, сплетений (невриты, плекситы);
— нарушения зрения (увеит, хориоретинит, неврит зрительного нерва)
— отек, деформация, дефигурация, ограничение активных и пассивных движений;
— болезненность при пальпации (артриты, артрозы, остеоартрозы);
— отек, болезненность, ограничение движений околосуставных сумок (бурситы);
— болезненность, отек по ходу сухожилий (тендовагиниты);
— подкожные узелки (фиброзиты, целлюлиты);
— нарушения ритма сердца, проводимости, тахикардия, брадикардия, гипотония, ослабление тонов сердца, одышка (очаговый миокардит, блокада ножек пучка Гиса, дистрофические изменения в миокарде);
-увеличение, отек, местная гиперемия мошонки с одной или обеих сторон (орхиты, орхоэпидимиты)
— нарушения менструального цикла, потенции
— бесплодие

Лабораторные исследования:
ОАК: лейкопения с относительным лимфоцитозом, увеличение СОЭ. Изменения более выражены в зависимости от тяжести.
ОАМ: лейкоцитурия, микропротеинурия, микрогематурия (как проявление синдрома лихорадки)
Биохимические анализы крови: повышение активности АЛТ, АСТ, билирубина за счет прямого (гепатит бруцеллезной этиологии — редко);
Анализ СМЖ: повышенное давление, прозрачная, лимфоцитарный плеоцитоз (серозный менингит бруцеллезной этиологии).

Специфические методы:
Выделение культуры Brucella Spp. (из крови) и определение чувствительности к антибактериальным препаратам. Для получения культуры бруцелл из крови используется бифазный метод Castaneda, при котором значительно уменьшается риск лабораторного заражения. Рекомендуется использовать транспортную среду, которая представляет собой герметично закрытые стерильные флаконы объёмом 20 мл с жидкой питательной средой, являющейся средой накопления. Культуры бруцелл из крови положительны до 4-го дня инкубации, большинство культур крови — между 7 и 21, и только 2% — после 27-го дня. Поэтому, посевы необходимо инкубировать по крайней мере 45 дней до выдачи отрицательного результата. Гемокультура чаще выделяется от больных в период бактериемии. Частота положительных результатов обычно коррелирует с остротой процесса и высокими титрами серологических реакций. Однако нередки случаи выделения гемокультуры от больных с нормальной температурой и отрицательными серологическими реакциями.
Забор венозной крови производится до начала антибактериальной терапии (на высоте температуры) в объеме 5 мл в транспортную среду с последующей доставкой в лабораторию особо опасных инфекций городского или областного Департамента охраны общественного здоровья (ДООЗ).

Положительная реакция Райта 1:200 и выше, или реакция Райта /= 1:200 или как минимум четырехкратное увеличение титра
титр агглютинирующих антител

источник

Читайте также:  Акт эпизоотологического обследования при бруцеллеза