Меню Рубрики

Иммуноглобулин а при бруцеллезе

Бруцеллез (лихорадка мальтийская, средиземноморская, гибралтарская, кипрская, ундулирующая, тифомалярийная, болезнь Банга) – инфекционное заболевание из группы бактериальных зоонозов, возбудителем которого являются микроорганизмы рода Brucella. Патогенными для человека являются В. melitensis, Br. abortus, Br. suis. Инфицирование человека происходит преимущественно алиментарным путем, реже контактным или аэрогенным. Представляет собой системное инфекционно-аллергическое заболевание со склонностью к хроническому рецидивирующему течению с преимущественным поражением опорно-двигательной, нервной и мочеполовой систем организма. В зависимости от клинической картины выделяют острую, подострую, хроническую и резидуальную форму бруцеллеза. Наиболее чувствительным в настоящее время является иммуноферментный анализ (ИФА), который рекомендуют в качестве экспресс-метода при массовых обследованиях.

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Бруцеллез — зоонозная инфекция, характеризующаяся полиорганным поражением и склонностью к хронизации. Значимым патогенетическим компонентом бруцеллеза является аллергическая реактивность. Передача бруцелл происходит в основном пищевым и водным путем, наиболее часто через молоко и мясо зараженных животных. У скотоводов может реализоваться воздушный и контактный путь передачи бруцеллеза. Диагноз устанавливается при выявлении возбудителя в крови, пунктате лимфатического узла или цереброспинальной жидкости.

Заболевание вызывается неподвижными полиморфными грамположительными микроорганизмами рода Brucella. Вид бруцелл, вызывающих инфекцию, оказывает влияние на тяжесть течения, наиболее тяжело протекает бруцеллез, обусловленный заражением Brucella melitensis. Бруцеллы высокоинвазивны, размножаются внутри клеток организма хозяина, но способны сохранять активность и вне клетки. В окружающей среде устойчивы, сохраняются в воде более двух месяцев, три месяца — в сыром мясе (30 дней — в засоленном), около двух месяцев — в брынзе и до четырех — в шерсти животных. Губительно для бруцелл кипячение, нагревание до 60 °С убивает их через 30 минут.

Резервуаром бруцеллеза являются животные, источником заражения для человека преимущественно являются козы, овцы, коровы и свиньи. В некоторых случаях возможна передача от лошадей, верблюдов, некоторых других животных. Выделение возбудителя больными животными происходит с испражнениями (кал, моча), молоком, амниотической жидкостью. Передача инфекции осуществляется преимущественно фекально-оральным механизмом, чаще всего пищевым и водным путем, в некоторых случаях возможна реализация контактно-бытового (при внедрении возбудителя через микротравмы кожи и слизистых оболочек) и аэрогенного (при вдыхании инфицированной пыли) пути.

Значительную эпидемиологическую опасность представляют собой молоко, полученное от больных животных, и молочные продукты (брынза, кумыс, сыры), мясо, изделия из животного сырья (шерсть, кожа). Животные загрязняют испражнениями почву, воду, корм, что также может способствовать заражению человека непищевым путем. Контактно-бытовой и воздушно-пылевой пути реализуются при уходе за животными и обработке животного сырья.

При бруцеллезе у беременных существует вероятность внутриутробной передачи инфекции, кроме того, возможна постнатальная передача при лактации. Люди обладают высокой восприимчивостью к бруцеллезу, после перенесения инфекции в течение 6-9 месяцев сохраняется иммунитет. Повторное инфицирование бруцеллами отмечается в 2-7 % случаев.

Инкубационный период бруцеллеза в среднем составляет 1-4 недели, но при формировании латентного носительства удлиняется до 2-3 месяцев. Острый бруцеллез обычно развивается быстро, у пожилых лиц начало может быть постепенным (в этом случае больные отмечают продромальные явления в виде общего недомогания, бессонницы, разбитости, артралгий и миалгий с постепенным нарастанием интоксикации на протяжении нескольких дней). Температура тела резко поднимается, сильный озноб чередуется с потом, развивается интоксикация, чаще всего умеренная, несмотря на выраженную температурную реакцию.

Хронический бруцеллез протекает волнообразно, с проявлением симптоматики полиорганных поражений. При этом симптомы общей инфекционной интоксикации обычно выражены умеренно, температура редко превышает субфебрильные значения. Промежутки между обострениями заболевания могут продолжаться 1-2 месяца. В случае формирования нового инфекционного очага внутри организма общее состояние ухудшается. Симптоматика хронического бруцеллеза зависит от преимущественного поражения той или иной функциональной системы возбудителем и выраженности аллергического компонента.

Достаточным для подтверждения диагноза является определение антигенов бруцелл и антител к ним в крови пациента при помощи серологических методов. Исследованию подвергается обычно сыворотка крови, но возможно обнаружение антигенов и в спинномозговой жидкости. Положительный результат серологического исследования не менее чем в 3-4 различных тестах, с характерной соответствующей динамикой показателей, является достаточным основанием для подтверждения этиологии заболевания. Начиная с 20-25-го дня болезни и в течение длительного периода (несколько лет) после выздоровления отмечается положительная реакция на кожную пробу Бюрне (подкожное введение бруцеллина).

Серологические методы также могут быть полезны для дифференцировки острой и хронической формы бруцеллеза. С этой целью может выполняться определение отдельных классов иммуноглобулинов.

Для чего используется исследование?

  • Для выявления инфекции (острой и хронической).

Когда назначается исследование?

  • При симптомах бруцеллеза (остросептической формы): высокая температура 39-40 °С и выше, озноб, потливость, слабость, миалгия, артралгия, артрит;
  • при обследовании пациентов с изолированным поражением мочеполовой системы и суставов при наличии в анамнезе указаний на употребление сырого козьего молока, особенно в эндемичных по бруцеллезу районах, и профессиональных особенностей (ветеринары, работники молочной и мясной промышленности);
  • при эпидемиологическом обследовании населения и при отборе лиц для вакцинации против бруцеллезной инфекции;
  • дифференциальная диагностика с гриппом, брюшным тифом, малярией, инфекционным мононуклеозом, лептоспирозом, лимфогранулематозом, ревматоидным полиартритом.

Референсные значения: антитела не обнаружены.

Коэффициент позитивности (КП):

1,1 – положительный результат (антитела обнаружены).

КП – концентрация специфических антител в единице объема. Чем выше КП пробы, тем выше концентрация антител.

  • отсутствие инфекции;
  • слабая иммунная реакция пациента;
  • низкий уровень антител.
  • острая инфекция;
  • рецидив заболевания;
  • хроническая форма инфекции.

В случае получения сомнительного результата рекомендуется повторить исследование через 10-14 дней. При повторном результате «Сомнительно» результат следует рассматривать как отрицательный.

В случае заражения бактерией Brucella сначала появляются антитела IgM, затем через некоторое время антитела IgG. Диагноз «острый бруцеллез» подтверждается выявлением антител при острой симптоматике заболевания, совместным выявлением антител IgG, IgA, IgM или только IgM. Если было применено лечение, в течение 2-4 месяцев концентрация IgG, как правило, значительно уменьшается.

В случае хронического бруцеллеза особое значение имеют антитела IgG и IgA. Они свидетельствуют также о давно перенесенном заражении.

Наличие IgA, IgG при отсутствии IgM говорит о хронической инфекции или реинфекции бруцеллой.

[40-063] Клинический и биохимический анализы крови — основные показатели [07-056] Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест/микрореакция преципитации), титр

источник

РЦРЗ (Республиканский центр развития здравоохранения МЗ РК)
Версия: Клинические протоколы МЗ РК — 2018

Одобрен
Объединенной комиссией по качеству медицинских услуг
Министерства здравоохранения Республики Казахстан
от «29» марта 2019 года
Протокол №60

Бруцеллёз – зоонозное инфекционно-аллергическое заболевание, вызываемое бактериями рода Brucella, протекающее в латентной, острой и хронической формах. Острые формы протекают по типу токсико-бактериемической инфекции. Хронические формы характеризуются выраженным полиморфизмом с преимущественным поражением опорно-двигательной, нервной, мочеполовой и др. систем; склонностью к рецидивирующему течению с развитием инвалидизирующих последствий.

Название протокола: Бруцеллез

Код Название
А23 Бруцеллез
А23.0 Бруцеллез, вызванный Brucella melitensis
А23.1 Бруцеллез, вызванный Brucella abortus
A23.2 Бруцеллез, вызванный Brucella suis
A23.3 Бруцеллез, вызванный Brucella canis
A23.8 Другие формы бруцеллеза
A23.9 Бруцеллез неуточненный

Дата разработки/пересмотра протокола: 2015 год (пересмотр 2018 г.)

Сокращения, используемые в протоколе:

суточная доза
IgG иммуноглобулины класса G
IgM иммуноглобулины класса М
IgА иммуноглобулины класса А
per os перорально (внутрь)
АЛТ аланинаминотрансфераза
АСТ аспартатаминотрансфераза
ВНС вегетативная нервная система
ВОЗ Всемирная организация здравоохранения
ИФА иммуноферментный анализ
НПВП нестероидные противовоспалительные препараты
ОАК общий анализ крови
ОАМ общий анализ мочи
ОНМК острое нарушение мозгового кровообращения
ПНС периферическая нервная система
ПЦР полимеразная цепная реакция
РА реакция агглютинации Райта
РБТ
РХ

Роз Бенгал проба
реакция агглютинации пластинчатая Хеддльсона
РФ
СМЖ
ревматоидный фактор
спинномозговая жидкость
ССС сердечно-сосудистая система
ТМП-СМЗ триметоприм- сульфаметоксазол
УЗДГ ультразвуковая доплерография
УЗИ ультразвуковое исследование
ЦНС центральная нервная система

Пользователи протокола: инфекционисты, терапевты, врачи общей практики, терапевты, акушер-гинекологи, невропатологи, урологи, ревматологи, клинические фармакологи.

Категория пациентов: взрослые, в том числе беременные.

Шкала уровня доказательности:

А Высококачественный мета-анализ, систематический обзор РКИ или крупное РКИ с очень низкой вероятностью (++) систематической ошибки, результаты которых могут быть распространены на соответствующую популяцию.
В Высококачественный (++) систематический обзор когортных или исследований случай-контроль или высококачественное (++) когортных или исследований случай-контроль с очень низким риском систематической ошибки или РКИ с невысоким (+) риском систематической ошибки, результаты которых могут быть распространены на соответствующую популяцию.
С Когортное или исследование случай-контроль или контролируемое исследование без рандомизации с невысоким риском систематической ошибки (+), результаты которых могут быть распространены на соответствующую популяцию или РКИ с очень низким или невысоким риском систематической ошибки (++ или +), результаты которых не могут быть непосредственно распространены на соответствующую популяцию.
D Описание серии случаев или неконтролируемое исследование или мнение экспертов.
GPP Наилучшая клиническая практика.
Клиническая форма Степень тяжести
и стадия компенсации
инфекционного процесса
Органопатология
(очаговые проявления)
Латентный бруцеллез (субклиническая форма, положительно реагирующие по серо- и/или аллергическим реакциям)
Острый бруцеллез (длительность болезни до 3 месяцев)
  • Легкое течение
  • Среднетяжелое течение
  • Тяжелое течение
Опорно-двигательный аппарат: артрит, пери- и параартрит, сакроилеит, остеоартрит, артроз, спондилоартрит, спондилит, спондилодисцит, спондилез, бурсит, тендовагинит, фиброзит, периостит, перихондрит, остеохондроз и т.д.
Нервная система
ЦНС: менингит, энцефалит, миелит, васкулит сосудов головного мозга, вертебро-базилярная недостаточность, гипертензионный, диэнцефальный, гипоталамический синдромы и т.д.
ПНС: неврит, радикулит, плексит, солярит, корешковый синдром и т.д.
ВНС: вегето-сосудистая дистония, метеочувствительность, нарушения микроцикуляции, атония кишечника и т.д.
Психобруцеллез:
астеноневротический синдром, депрессивный синдром,
галлюциноз и т.д.
Органы чувств: невриты зрительного и слухового нерва, увеит, увеонейрохориоретинит и т.д.
ССС: миокардит, перикардит, эндокардит, нарушения ритма и проводимости, миокардиодистрофия, флебит,тромбофлебит и т.д.
Половая система: орхит, орхоэпидидимит, сальпингооофорит, нарушения менструального цикла, бесплодие и т.д.
Мочевыделительная система: гломерулонефрит и др.
Дыхательная система: бронхит, пневмония – редко.
Пищеварительная система: гепатит, холецистит, гастрит – редко Подострый бруцеллез (длительность болезни от 3 до 6 месяцев) Хронический бруцеллез (длительность болезни свыше 6 мес.):
Первично-хроническийбруцеллез (отсутствие острой фазы при хроническом течении болезни);
Вторично-хронический бруцеллез (следующая после острого и\или подострого бруцеллеза стадия болезни)
  • Компенсация

(трудоспособность сохранена)

  • Субкомпенсация

(трудоспособность снижена)

  • Декомпенсация

(трудоспособность утеряна)

Остаточные явленияперенесенного бруцеллеза (наличие дегенеративно-дистрофических изменений в тканях при отсутствии в организме возбудителя) — Повторный бруцеллез (с указанием формы):
суперинфекция – повторное заражение на фоне продолжающегося инфекционного процесса;
реинфекция – повторное заражение после завершения предшествующего инфекционного процесса В зависимости от клинической формы
  • Острый бруцеллез
  • Подострый бруцеллез
  • Вторично-хронический бруцеллез
  • Первично-хронический бруцеллез

Бруцеллёз человека – это системная инфекция, вовлекающая в патологический процесс многие органы и ткани (см. «Органопатология»).

Острый бруцеллез (длительность заболевания до 3 месяцев) протекает по типу токсико-бактериемиемической инфекции, характеризуется ремиттирующей лихорадкой с ознобами и потами, полимикролимфаденопатией, гепато/гепатоспленомегалией, полиартронейромиалгиями.

Подострый бруцеллез (длительность заболевания от 3 до 6 месяцев) – следующая за острым бруцеллезом стадия болезни, характеризуется появлением очагового поражения органов и систем инфекционно-аллергического и септико-метастатического характера на фоне клинических проявлений бактериемической инфекции (лихорадка, ознобы, поты, лимфаденопатия, гепатоспленомегалия).
При развитии острого бруцеллеза на сенсибилизированном фоне (в эндемичном регионе) отмечается раннее вовлечение в патологический процесс (в сроке до 3 месяцев) преимущественно опорно-двигательной, нервной, половой и других систем с развитием воспалительного процесса инфекционно-аллергического (быстро проходящего «летучего») и септико-метастатического характера (более длительного) [1].

Вторично-хронический бруцеллез (длительность заболевания свыше 6 месяцев), следующая стадия за острым и/или подострым бруцеллезом, характеризуется появлением или обострением воспалительных процессов в пораженных органах. Признаки токсикобактериемической инфекции (лихорадка, ознобы, поты, лимфаденопатия, гепатоспленомегалия) могут быть умеренными или отсутствовать. Критерий постановки диагноза: наличие острой/подострой стадии в анамнезе, подтвержденной лабораторными методами.

Читайте также:  Актриса которая умерла от бруцеллеза

Первично-хронический бруцеллез (длительность заболевания свыше 6 месяцев), характеризуется вялым торпидным течением в виде воспалительных процессов в пораженных органах. Признаки токсикобактериемической инфекции (лихорадка, ознобы, поты, лимфаденопатия, гепатоспленомегалия) могут быть умеренными или отсутствовать. Критерий постановки диагноза: отсутствие острой/подострой стадии в анамнезе, подтвержденной лабораторными методами.
В эндемичном регионе в связи нестойкостью и непрочностью иммунитета люди подвергаются супер- и реинфицированию. Поэтому целесообразно выделять форму заболевания — Повторный бруцеллез: суперинфекция – повторное заражение на фоне продолжающегося инфекционного процесса; реинфекция – повторное заражение после завершения предшествующего инфекционного процесса. Повторный бруцеллез может протекать в острой, подострой, первично- и вторично-хронической формах (соответственно определению).
В эндемичных очагах бруцеллеза чаще встречаются латентные и первично-хронические формы бруцеллеза.

Примерная формулировка диагноза [2]:
— Острый бруцеллез, среднетяжелое течение. Полиартралгия. (РА-1:800, РХ-резко положительная).
— Острый бруцеллез, среднетяжелое течение. Артрит левого коленного сустава. Бурсит правого локтевого сустава (РА-1:400, РХ-положительная, ИФА IgM – положительные).
— Острый бруцеллез, тяжелое течение. Суперинфекция на фоне первично-хронического бруцеллеза. Двухсторонний сакроилеит. Остеохондроз пояснично-крестцового отдела позвоночника. Артроз правого коленного сустава (РА-1:200, РХ-положительная, ИФА IgG – положительные).
— Подострый бруцеллез, тяжелое течение. Серозный менингит (ПЦР Brucella spp.)
-Первично-хронический бруцеллез. Субкомпенсация. Артроз коленных, голеностопных суставов. Остеохондроз пояснично-крестцового отдела позвоночника, корешковый синдром (РА-1:100, РХ-положительная, Роз-Бенгал тест – положительный).
-Вторично-хронический бруцеллез. Декомпенсация. Спондилит L2, L3, осложненный превертабральным натечником. Корешковый синдром. Артрозо-артрит пястно-фаланговых суставов. (РА-1:200, РХ-положительная, Роз-Бенгал тест – положительный).
-Подострый бруцеллез, тяжелое течение. Реинфекция. Менингоэнцефаломиелит. (РА-1:200, РХ-положительная, ИФА IgG – положительные).
При каждой форме следует обязательно указать подтверждающие лабораторные тесты, органопатологию, при острой/подострой формах – тяжесть течения, при хронических формах – стадию компенсации.

МЕТОДЫ, ПОДХОДЫ И ПРОЦЕДУРЫ ДИАГНОСТИКИ

Диагностические критерии

Жалобы:
Острый/подострый бруцеллез:
— повышение температуры (чаще во второй половине дня), озноб, потливость (чаще ночная при снижении температуры; иногда профузная, требующая смены нательного и постельного белья);
-боли костно-суставные, нервно-мышечные, в пояснице (полиартронейромиалгии «летучего» характера, «ломота» в теле);
-отечность, покраснение и ограничение движений в области пораженных суставов;
-слабость, повышенная утомляемость, снижение работоспособности;
-головная боль;
-метеочувствительность
Первично-и вторично-хронический бруцеллез:
-температура субфебрильная (при активности инфекционного процесса) и нормальная (при отсутствии активности);
-боли костно-суставные, нервно-мышечные, боли в пояснице (более стойкого характера);
— ограничение активных и пассивных движений; хруст в пораженных суставах;
— слабость, повышенная утомляемость, снижение работоспособности;
— головная боль, головокружение (нейробруцеллез);
— метеочувствительность;
— раздражительность, плаксивость, быстрая смена настроения, обилие жалоб;
— снижение памяти;
— нарушения менструального цикла, потенции.

Анамнез:
Острый/подострый бруцеллез:
— острое начало с озноба и повышения температуры во второй половине дня и последующим потоотделением (ночью) при её снижении;
— относительно удовлетворительное самочувствие в начале заболевания;
— присоединение интоксикации (головная боль, слабость, снижение веса) при длительности заболевания более 2-3 недель;
Первично-и вторично-хронический бруцеллез:
— связь обострения процесса с воздействием неблагоприятных факторов (переохлаждение, перегревание, повышенные физические и умственные нагрузки, инсоляция, посещение саун, получение физиопроцедур с термическим действием, беременность, роды, присоединение интеркуррентных заболеваний, стрессы, недостаточное белковое питание и т.д.).

Эпидемиологический анамнез:
— участие в окотной кампании;
— уход за животными (мелкий и крупный рогатый скот);
— забой животных и разделка туш, потрошение кишок;
— контакт с сырым мясом, фаршем, внутренними органами животных (печень, почки, легкие, лимфатические узлы, кишки и т.д.);
— употребление сырого молока или молочных продуктов кустарного производства, прошедших термическую обработку менее 100С с короткой экспозицией (сливки, сметана, брынза, творог);
— употребление недостаточно термически обработанного мяса (шашлык, донер, шаурма, самса с мясом и т.д.);
— обработка шкур животных, пошив изделий из шкур (каракуль, каракульча);
— стрижка овец;
— работа с шерстью животных, первичная обработка, вычесывание пуха и т.д.;
— уборка и проведение ремонтных работ в помещениях для животных;
— производство мясокостной муки;
— работа на мясокомбинате, мясных рынках;
— работа на молочных фермах, заводах;
— профессия (доярка, чабан, ветеринар, лабораторный работник, работающий с живыми культурами бруцелл и с кровью)
— работа поваром, шашлычником;
— проживание в гиперэндемичных регионах по бруцеллезу (Жамбылская, Кызылординская, Южно-Казахстанская, Алматинская области);
— пребывание (питание) в эндемичных регионах за пределами республики (Турция, Кавказ, Кыргызстан и др.)
-эпидемиологическая связь с известной вспышкой бруцеллеза или подтвержденным случаем бруцеллеза у людей
— пересадка пациентам органов от доноров, перенесших бруцеллез

Физикальное обследование:
Острый/подострый бруцеллез
— в период озноба: бледность лица, кожные покровы конечностей холодные на ощупь;
— в период лихорадки: гиперемия лица, горячая кожа, тахикардия, гипотония;
— в период апирексии: общий и локальный (ладоней и стоп) гипергидроз;
— увеличение печени;
— полимикроаденопатия: пальпируются все группы лимфатических узлов, мелкие (размером с фасоль, горошину), безболезненные;
— увеличение селезенки ( в 30% случаев);
При тяжелом течении болезни:
— упорная головная боль (при менингите бруцеллезной этиологии);
— поражение черепно-мозговых нервов (при развитии энцефалита).
При развитии острого бруцеллеза (ре- и суперинфекции) на фоне хронического бруцеллеза возможно развитие органопатологии (см.классификацию):
— боли, отек, гиперемия, локальная гипертермия, ограничение движений в пораженных суставах (чаще крупных, но могут во всех без исключения вплоть до височно-челюстного, межпозвоночных, межфаланговых и т.д.), сочленениях (крестцово-подвздошном, ключично-акромиальном и др.), позвоночнике (спондилодисциты, спондилиты, спондилоартриты);
— боли, отек, гиперемия, местная гипертермия яичек и его придатков (одно-или двухстороннее).

Первично-и вторично-хронический бруцеллез:
общий или локальный (ладони, стопы) гипергидроз;
— микрополилимфаденопатия (пальпируются все группы лимфатических узлов мелкие, плотные, безболезненные);
— гепатоспленомегалия (при активности инфекционного процесса);
— положительные менингеальные симптомы (бруцеллезный менингит)
— поражения черепно-мозговых нервов, нарушения сознания (бруцеллезный менингоэнцефалит)
— двигательные расстройства, нарушения функции тазовых органов (бруцеллезный миелит)
— болезненная пальпация паравертебральных точек (остеохондроз позвоночника)
— положительные симптомы натяжения Ласега (корешковый синдром);
— болезненность по ходу нервных стволов, сплетений (невриты, плекситы);
— нарушения зрения (увеит, хориоретинит, неврит зрительного нерва)
— отек, деформация, дефигурация, ограничение активных и пассивных движений;
— болезненность при пальпации (артриты, артрозы, остеоартрозы);
— отек, болезненность, ограничение движений околосуставных сумок (бурситы);
— болезненность, отек по ходу сухожилий (тендовагиниты);
— подкожные узелки (фиброзиты, целлюлиты);
— нарушения ритма сердца, проводимости, тахикардия, брадикардия, гипотония, ослабление тонов сердца, одышка (очаговый миокардит, блокада ножек пучка Гиса, дистрофические изменения в миокарде);
-увеличение, отек, местная гиперемия мошонки с одной или обеих сторон (орхиты, орхоэпидимиты)
— нарушения менструального цикла, потенции
— бесплодие

Лабораторные исследования:
ОАК: лейкопения с относительным лимфоцитозом, увеличение СОЭ. Изменения более выражены в зависимости от тяжести.
ОАМ: лейкоцитурия, микропротеинурия, микрогематурия (как проявление синдрома лихорадки)
Биохимические анализы крови: повышение активности АЛТ, АСТ, билирубина за счет прямого (гепатит бруцеллезной этиологии — редко);
Анализ СМЖ: повышенное давление, прозрачная, лимфоцитарный плеоцитоз (серозный менингит бруцеллезной этиологии).

Специфические методы:
Выделение культуры Brucella Spp. (из крови) и определение чувствительности к антибактериальным препаратам. Для получения культуры бруцелл из крови используется бифазный метод Castaneda, при котором значительно уменьшается риск лабораторного заражения. Рекомендуется использовать транспортную среду, которая представляет собой герметично закрытые стерильные флаконы объёмом 20 мл с жидкой питательной средой, являющейся средой накопления. Культуры бруцелл из крови положительны до 4-го дня инкубации, большинство культур крови — между 7 и 21, и только 2% — после 27-го дня. Поэтому, посевы необходимо инкубировать по крайней мере 45 дней до выдачи отрицательного результата. Гемокультура чаще выделяется от больных в период бактериемии. Частота положительных результатов обычно коррелирует с остротой процесса и высокими титрами серологических реакций. Однако нередки случаи выделения гемокультуры от больных с нормальной температурой и отрицательными серологическими реакциями.
Забор венозной крови производится до начала антибактериальной терапии (на высоте температуры) в объеме 5 мл в транспортную среду с последующей доставкой в лабораторию особо опасных инфекций городского или областного Департамента охраны общественного здоровья (ДООЗ).

Положительная реакция Райта 1:200 и выше, или реакция Райта /= 1:200 или как минимум четырехкратное увеличение титра
титр агглютинирующих антител

источник

Диагностическое значение иммуноглобулинов как носителей антител при серологической диагностике бруцеллеза

Серологическая диагностика бруцеллеза является самой распространенной в ветеринарной практике.

В продолжение всей истории борьбы с бруцеллезом сельскохозяйственных животных серологические методы диагностики заболевания находятся в состоянии совершенствования старых методов и разработки новых. К настоящему времени широко экспериментируется или уже регламентируется в инструкциях некоторых стран ряд новых методов.

Поиски более совершенных методов обусловливаются необходимостью полного выявления в неблагополучных стадах и отарах всех инфицированных животных, так как до настоящего времени, как правило, не удается серологическая дифференциация здоровых животных от больных.

Скрытое бруцеллоносительство, при котором не бывает антител в крови животных, сильно выраженное количественное и качественное колебание бруцеллезных антител в крови животных в период инфекционного процесса и после него, появление у животных поствакцинальных антител, возникающих после вакцинации вакциной из штамма № 19 или другими агглютиногенными или слабоагглютиногенными вакцинами, а также влияние на образование антител возраста, физиологического состояния животных и другие факторы вызывают необходимость в повторном применении на практике методов прямой и дифференциальной диагностики бруцеллезных антител.

Существенное значение для совершенствования серологической диагностики вообще и серологической диагностики бруцеллеза в частности имеет разрабатываемая в последнее десятилетие иммунологическая классификация сывороточных глобулинов — носителей антител. По этой классификации иммунные глобулины человека делятся на 5 классов, различающихся в зависимости от их химической структуры. Обозначение этих классов следующее: IgG, IgM, IgA, IgD и IgE (Ig — это сокращенное название иммуноглобулина). Указанные классы иммуноглобулинов могут также обозначаться G, М, А, D и Е. Иммунные белки, различающиеся по константам седиментации Свеберга, получаемые на ультрацентрифуге в искусственном гравитационном поле, имеют разную степень иммунной активности. По современной классификации гамма-глобулины, обозначаемые 7S, преимущественно входят в класс IgG, кроме того, в класс IgA и IgD. Иммунные белки, обозначаемые 19S, входят в класс IgM, а иммуноглобулин 9S—в класс IgE.

Иммуноглобулины домашних животных, по данным Герберта (1974), изучены недостаточно по сравнению с иммуноглобулинами человека. Некоторые иммуноглобулины у животных, как и у человека, представлены различными классами, имеющими одинаковое название с человеческими, например IgG, IgM. Эти иммуноглобулины характерны для сельскохозяйственных животных и птиц.

Сравнение других иммуноглобулинов животных с иммуноглобулинами человека является весьма приблизительным, так как идентификация их проводится по признаку электрофоретической подвижности, а однозначное название иммуноглобулинов может быть тогда, когда они сравнимы еще и по другим признакам, например по константе седиментации, содержанию углеводов, месту синтеза, характеру реакции как антитела и др. Иммуноглобулины, имеющие наименьшую подвижность в электрическом поле, обозначаются у2а, в некоторых случаях они подразделяются на у2 а , у2 b , 72 c , где буква а соответствует компоненту с меньшей подвижностью, чем компонент, обозначенный буквой в и т. д. Глобулины с большей подвижностью, чем у2, обозначаются yI. Их также подразделяют на подгруппы. Наиболее подвижными являются глобулины, обозначаемые 19S; их относят к макроглобулинам и обозначают буквой М.

До настоящего времени подробно изучались указанные первые 2 класса иммуноглобулинов, имеющих довольно подробную характеристику. Иммуноглобулин G, по общему признанию, является наиболее активным антителом. Так, по данным Бойда (1969), гаммаглобулины, обозначаемые 7S, проявляют до 85—90% всей активности антител. Иммуноглобулины класса IgG имеют относительно небольшого размера молекулы (микроглобулины) и по 2 активных центра, способных присоединяться к детерминантному участку антигена. Эти антитела обнаруживаются не только в крови, но и в тканевых жидкостях, так как проходят через стенки сосудов. IgG вместе с тем возникают несколько медленнее по сравнению с IgM, но более длительно удерживаются в организме. Есть предположение (Бойд, 1969), что IgG ингибируют биосинтез IgM-антител. Так, например, если в первые дни (7 дней) возникают IgM-антитела, то к 25-му дню количество их постепенно уменьшается вплоть до полного исчезновения и нарастает количество IgG-антител. Важно отметить, что по современному представлению иммуноглобулины класса IgG (7S гаммаглобулин) синтезируются одним из двух типов плазматических клеток, принимающих участие в образовании антител, а другой тип тех же клеток синтезирует иммуноглобулины класса IgM (19S гаммаглобулин). Поэтому антитела обоих классов можно обнаружить в различных тканях иммунных животных.

Читайте также:  Абортированный плод при бруцеллезе

IgG-антитела участвуют во всех серологических реакциях, которые основаны на соединении антигена с антителом. Однако требуется сравнительно большее количество тысяч молекул IgG-антител, чтобы осуществился феномен реакции агглютинации или реакции связывания комплемента, тогда как IgM-антител для тех же самых показателей требуются единицы молекул. Считается, что IgM-антитела более активны при их анализе в серологических реакциях с микробными антигенами, а IgG-антитела слабее проявляются с микробными антигенами, но более интенсивно с токсинами и другими подобными антигенами.

IgG-антитела имеют 75% тяжелых (относительная молекулярная масса 500 тыс.) аминокислотных цепей и 25% легких (относительная молекулярная масса 200 тыс.) цепей, соединенных между собой в молекулу днсульфиднымн связями. Эти цепи не разрываются при воздействии на них 2-меркаптоэтанолом. Иммунологическая активность этих антител в основном происходит за счет тяжелых цепей, следовательно, в особенности последних могут варьировать показания серологических реакции в зависимости от антигена и методики опыта. Каждый класс иммуноглобулинов имеет различающиеся тяжелые цепи. Например, показана большая разница между тяжелыми цепями иммуноглобулинов классов IgG и IgM.

IgM-антитела представляют собой крупные (относительная молекулярная масса 900 тыс.) молекулы и имеют значительно больше (до 10) активных центров взаимодействия с антигеном. Локализуются они преимущественно внутри сосудов крови. Эти антитела не проходят через плаценту. Поэтому в плодах животных могут быть обнаружены только IgG-антитела.

Практическое значение имеет свойство химического вещества 2-меркаптоэтаиола инактивировать IgM-антитела за счет разрыва дисульфитных связей, соединяющих части молекул. При аналогичной обработке IgG-антител их молекулы не изменяются. На этой основе считают возможным дифференцировать при помощи серологических реакций острую бруцеллезную инфекцию от хронической.

IgM-антитела стимулируются в организме животных только под влиянием грамнегативных бактерий.

По данным Герберта (1974), у крупного рогатого скота обнаруживаются в сыворотке крови 3 класса иммуноглобулинов — IgG, IgM, IgA. Иммуноглобулины класса IgG представлены и двумя подклассами — 1 gG1 и IgG2, различающимися по электрофоретической подвижности. Иммуноглобулины второго подкласса более подвижны, чем первого. Тяжелые цени обоих подклассов иммуноглобулинов класса IgG одинаковы. В молозиве обнаруживаются только иммуноглобулины подкласса IgG1 которые участвуют в реакции связывания комплемента, тогда как иммуноглобулины подкласса IgG2 в РСК не участвуют. У других животных (лошадей, овец и коз, свиней, а также собак, кошек и птиц) обнаружены иммуноглобулины разных классов и подклассов. Однако для серологии имеют реальное значение в основном иммуноглобулины с константой седиментации 7S (IgG) и 19S (IgM).

Рекомендации Комитета экспертов по бруцеллезу ФАО/ВОЗ (1971 г.) ограничиваются только двумя вышеуказанными классами иммуноглобулинов для исследований и обозначения в ветеринарной практике. Вместе с тем экспертами отмечено, что у телок после вакцинации их вакциной из штамма № 19 IgM-антитела появляются примерно на 5-й день после иммунизации и достигают максимального значения через 13 дней, в то время как IgG-антитела появляются одновременно с первыми или несколько позднее и достигают максимального значения на 28—42-й день после вакцинации. Напряжение IgM-антител уменьшается, но не всегда исчезает из сыворотки крови вакцинированных животных. Вместе с тем IgG-антитела исчезают из организма скорее, чем IgM-антитела.

После естественного инфицирования в организме появляются IgM — и IgG-антитела, но они резко различаются после вакцинации. Так, например, при бруцеллезе человека IgM-антитела являются основными агглютинирующими антителами, а IgG-антитела — фиксирующими комплемент, но часто не вызывают агглютинации корпускулярного антигена. В крови же крупного рогатого скота и IgM — и IgG — антитела вызывают агглютинацию, т. е. оба антитела агглютинируют корпускулярный антиген РА и способны фиксировать комплемент, т. е. соединяться с экстрактантигеном бруцелл. В крови свиней после их иммунизации вакциной из штамма № 19 IgM-антитела не фиксировали комплемент.

Отмечено, что на показания реакции связывания комплемента влияли следующие факторы: температура фиксации антигена (на холоде или при 37° С), структура антигена, виды сыворотки и класс антигена. Следовательно, при постановке РДСК на холоде можно получить лучшие результаты с одним и тем же классом иммуноглобулинов, чем при связывании комплемента при 37° С (см. РДСК при инфекционном заболевании, вызываемым Br. ovis, и при бруцеллезе).

Имеются сообщения о том, что неполные антитела у животных, вначале вакцинированных вакциной из штамма № 19 или 45/20, а затем инфицированных, обнаруживались дольше, чем агглютинирующие и фиксирующие комплемент антитела. Однако о наличии связи между инфекцией и неполными антителами не сообщается.

У собак, естественно инфицированных Br. canis, в сыворотке крови вначале появлялись IgM-антитела, а затем, через 7—13 дней, появлялись 4 подгруппы IgGS-антител и первые три IgGS-антител агглютинировали корпускулярный антиген.

В борьбе с бруцеллезом сельскохозяйственных животных имеет большое значение ранняя диагностика заболевания. Чем быстрее будут выявлены больные животные, тем раньше можно принять меры по ликвидации заболевания. Серологические реакции отвечают этому требованию более удовлетворительно по сравнению с методами аллергической, биологической и бактериологической диагностики. Диагноз на бруцеллез по реакции агглютинации и реакции связывания комплемента и другим реакциям, основанным на выявлении антител в крови, может быть установлен в близкие и отдаленные сроки после заражения животного бруцеллезом. После внедрения в организм заражающей дозы возбудителя через разные сроки у животных появляются в крови антитела. У крупного рогатого скота, овец, свиней антитела в крови появляются иногда на 5—8-й день после аборта, возникающего на почве генерализованного бруцеллеза. В других случаях в неблагополучном стаде молодняк заражается бруцеллезом в молочном периоде, а антитела в крови появляются через несколько месяцев или уже в период беременности (скрытое бруцеллоносительство). После наступившей бактериемии в крови животных могут быть обнаружены антитела методом РА раньше на 1-2 сут. чем по РСК. При параллельной постановке РА и РДСК эта разница не обнаруживается. Обычно такие случаи бывают на 5—8-е сут после наступившей бактериемии. Следовательно, ранний серологически и диагноз открывает для исследователя только тех зараженных животных, у которых инфекция уже приобретает активную форму. Животные, у которых инфекция находится в состоянии первичной латенции, не обнаруживаются серологическими методами, так как в крови таких животных еще не образовались бруцеллезные антитела. Поэтому важно, чтобы метод диагностики наиболее полно охватывал различные состояния инфекционного процесса, на этапах которого антитела могут быть разными. Например, в период начального развития инфекции обнаруживаются главным образом IgM-антитела, а в последующем — преимущественно IgG-антитела.

Бруцеллез протекает своеобразно почти у каждого в отдельности взятого животного, в зависимости от возраста, пола, беременности, физиологического состояния, вирулентности возбудителя, суперинфицирования и др. Поэтому в одном и том же неблагополучном стаде при возникновении инфекции наблюдаются индивидуумы, резко отличающиеся по времени и напряжению продукции антител. Кроме того, показания одной и тон же реакции выражение колеблются в зависимости от давности течения болезни и степени ее патологического проявления. Так, свежеинфицированные животные реагируют по РА в большем проценте, чем длительно болеющие; истощенные животные могут не реагировать либо реагировать очень слабо по всем реакциям.

Очень большое значение для своевременного распознавания болезнен имеет применяемый метод диагностики. Так, например, бараны, зараженные Br. ovis, в очень большом проценте реагируют по РДСК с экстракт-антигеном Br. ovis (до 95), но по РА они реагируют с корпускулярным антигеном Br. ovis слабо и в очень небольшом проценте (10—15), Эта разница объясняется тем, что клетки Br. ovis не имеют поверхностного бруцеллезного липополисахаридного S-антигена, следовательно, больные животные не имеют IgM-антител. Это положение в известной степени касается и бруцеллезной инфекции, поскольку поверхностно-оболочечный S-антиген сильно подвижен и резко снижается в клетках при диссоциации, происходящей в организме животных после начала бактериемии. Подвижность S-антигена немедленно отражается на степени эффективности отдельных реакций. Так, при параллельном исследовании по РА, РСК, РФ (реакции флокуляции) и КР (кольцевой реакции) сывороток крови крупного рогатого скота мы наблюдали несоответствие показаний от 0,5 до 8%. При этом меньше несовпадающих показаний отдельных реакций было с сыворотками свежеинфицировапных животных. Поэтому является общепризнанным, что при постановке двух, трех, четырех или большего количества реакций выявляется больных животных больше, чем при одной какой-либо реакции.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

источник

Антитела к бруцеллам lgM, IgG, Brucella spp IgM, IgG количественный — количественное определение антител IgM и IgG к бруцеллам (Brucella spp), которые свидетельствуют о наличии острого или перенесённом в прошлом заболевании.

Brucella species — это грамотрицательные аэробные коккобациллы, которые являются внутриклеточными паразитами человека и животных, и вызывающие бруцеллёз.

Бруцеллёз — зоонозная инфекция, передающаяся от больных животных человеку, при котором поражаются практически все органы. Он характеризуется длительным течением, тяжёлыми поражениями костно-суставного аппарата, сердечно-сосудистой и нервной систем. Передаётся человеку через мясо-молочные продукты и при непосредственном контакте с инфицированными тканями животных.

Клиническая картина при бруцеллёзе
Основные клинические проявления бруцеллеза: лихорадка, озноб, общая слабость, недомогание, головная боль, тошнота, рвота, жидкий стул или запоры, потеря аппетита, боли в мышцах и суставах, кашель и одышка при вовлечении лёгких.

Диагностика бруцеллёза — очень сложная задача, так как заболевание не имеет каких-либо специфических признаков, а также может протекать в бессимптомной, хронической и локализованной форме.

Приблизительно 20–40% случаев бруцеллёза — это локализованные формы заболевания, характеризующиеся изолированным поражением какого-либо органа, в большинстве случаев это орган мочеполовой, нервной системы, сердце, а также поражение суставов. Зачастую, локализованный бруцеллёз является последствием нераспознанной ранее остро-септической формы.

Антитела при бруцеллёзе
При инфицировании лимфоциты вырабатывают иммуноглобулины — специальные белки, нейтрализующие бактерии. Первыми начинают вырабатываться иммуноглобулины класса IgM. Уровень их достигает максимума в течение первых недель, а затем постепенно снижается. В крови IgM сохраняются на протяжении нескольких месяцев. Обнаружение в крови IgМ к бруцелле говорит об остром периоде инфекции.

Антитела класса IgG синтезируются через 2–4 недели после инфицирования и могут сохраняться в незначительном количестве в течении длительного времени. После повторного заражения, титр антител повышается вновь. Наличие в крови иммуноглобулинов класса G к бруцеллам говорит о наличие острого или о перенесённом в прошлом заболевании.

В случае заражения бактерией Brucella сначала появляются антитела IgM бруцеллёза, а только через некоторое время антитела IgG. Диагноз острого бруцеллёза имеет место, когда исследование выявило антитела IgM, IgG или только IgM.

Метод ИФА используется для диагностики острой и хронической формы бруцеллёза.

Показания:

  • диагностика бруцеллёза;
  • лихорадка или боли в суставах неясной причины;
  • вхождение в группу риска (работники или жители сельской местности; лица, употребляющие в пищу мясо-молочные продукты домашнего производства).

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 11 часов. Взятие крови производится натощак, спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.

Интерпретация результатов
Антитела IgM:

  • положительный результат составляет более 20 ед/мл;
  • сомнительный результат — 15–20 ед/мл;
  • отрицательный результат в случае IgM-антител составляет менее 15 ед/мл.

Антитела IgG:

  • положительный результат составляет более 30 ед/мл;
  • сомнительный результат — 20–30 ед/мл;
  • отрицательный результат составляет менее 20 ед/мл.

Положительный результат:

  • имеет место текущий острый бруцеллёз;
  • наличие IgG при отсутствии IgM говорит о хронической инфекции или реинфекции бруцеллой.
Читайте также:  Актриса умершая от бруцеллеза

Отрицательный результат:

  • инфицирование бруцеллой отсутствует;
  • инфицирование бруцеллой имеет место, однако не прошел достаточный срок для выработки иммунного ответа.

источник

Бруцеллез может протекать бессимптомно и выявляться только по положительным результатам серологических реакций. Выраженные формы инфекции можно разделить на три группы — острый, локализованный и хронический бруцеллез.

Острый бруцеллез. Инкубационный период при этой форме инфекции обычно колеблется от 7 до 21 дня, но иногда продолжается и несколько месяцев. Начало может быть острым с выраженными явлениями интоксикации, особенно в случае инфекции, вызванной В. melitensis. Однако чаще болезнь развивается постепенно с небольшим подъемом температуры тела. Больные жалуются на недомогание, утомляемость, головную боль, слабость, повышенное потоотделение, озноб, боли в области поясницы, кашель, артралгии и миалгии при отсутствии признаков локальных поражений; возможна анорсксия и потеря массы тела.

Типичным является обилие жалоб при немногочисленности объективных данных. Из числа последних наиболее выраженными можно считать спленомегалию (у 10—20% больных), лимфаденопатию (у 15% больных) и гепатомегалию (менее чем у 10%).

Локализованный бруцеллез. Патологический процесс может локализоваться почти в любой анатомической области, однако наиболее часто отмечаются следующие формы заболевания — остеомиелит, абсцесс селезенки, поражение мочеполовых органов, изменения в легких, эндокардит. Остеомиелит, как правило, поражает позвоночник, чаще пояснично-крестцовый отдел, с вовлечением в патологический процесс межпозвоночных дисков и прилежащих к ним позвонков. Ранние изменения в костях выявляются сканированием, в дальнейшем при рентгенографии обнаруживаются признаки остеопороза, эрозия передней пластинки позвонка и формирование остеофитов в виде клюва попугая. Значительно реже наблюдаются артриты, в основном поражающие коленные суставы. В селезенке возможно развитие абсцессов, на месте которых впоследствии формируются участки обызвествления. Бруцеллы могут вызывать эпидидимоорхиты и реже клинически выраженные поражения предстательной железы или почек. К неврологическим осложнениям бруцеллеза относят менингоэнцефалит, миелит, радикулит или невропатию. Редкими клиническими проявлениями бруцеллеза являются экссудативный плеврит и пневмония.

Наиболее частая причина смерти больных при бруцеллезе — бактериальный эндокардит. Регистрируется он главным образом у мужчин, характеризуется вялым течением, часто сопровождается недостаточностью кровообращения и артериальной эмболией. Для полного излечения этой формы бруцеллеза требуется как хирургическая замена пораженных клапанов, так и терапия противомикробными средствами.

Хронический бруцеллез. К данной форме инфекции относят случаи заболевания, длящиеся более года после заражения. В эту группу включают больных с рецидивирующим течением болезни без признаков очаговой инфекции, в случае локализации инфекционного процесса в одном или нескольких органах, а также больных, у которых не наблюдается объективных признаков болезни (например, отсутствует лихорадка) и нет указаний на активный бруцеллез (согласно результатам серологических реакций и посевов на наличие бруцелл). Весьма вероятно, что у лиц, относящихся к этой группе, в основе жалоб на утомляемость и общую слабость лежат цсихоневротические нарушения, а не активный бруцеллез.

У ветеринарных врачей, занимающихся удалением плаценты у инфицированных животных, встречается необычное проявление инфекции — появление на кистях рук эритематозных, папулезных или пустулезных высыпаний, происхождение которых, возможно, связано с реакциями повышенной чувствительности к антигенам бруцелл.

Диагноз. Бруцелле з- -относительно редкое заболевание, и имеется ряд болезней, имеющих сходные с ним клинические признаки: например, грипп, инфекционный мононуклеоз, токсоплазмоз, вирусный гепатит, генерализованная гонококковая инфекция, ревматизм, системная красная волчанка, туберкулез, лептоспироз и брюшной тиф. При наличии соответствующей клинической картины есть больше оснований предположить инфицированность бруцеллами у фермеров, работников скотобоен, а также у других лиц, имеющих контакты с контаминированным сырьем и продуктами животного происхождения.

Основное доказательство наличия бруцеллезной инфекции заключается в выделении возбудителя. Следует помнить о том, что проведение посевов инфицированного материала может представлять опасность для персонала лабораторий. Весь посевной материал должен быть четко маркирован возможен бруцеллез, и все манипуляции с ним должны проводиться в стерильных условиях в специальном вытяжном шкафу, соответствующем требованиям для работы с инфекциониыми агентами III класса. В лабораториях, не имеющих указанных условий, выделение и культивирование бруцелл проводить не рекомендуется.

Культивирование бруцелл. Примерно в 50% случаев при посевах крови, взятой на ранних стадиях болезни от не получавших антибиотики больных, в триптиказный соевый бульон и культивировании их в присутствии 5—10% двуокиси углерода через 1—3 нед удается получить чистую культуру бруцелл. Однако во многих лабораториях посевы крови уничтожаются после 10-дневной инкубации. Поэтому лечащий врач должен сообщить в лабораторию и подозрении на бруцеллез и убедить врача-лаборанта наблюдать за подобными посевами не менее 4 нед. При остром течении болезни в ряде случаев при посевах крови получают отрицательный результат, а при посевах костного мозга — положительный. На более поздних стадия х- болезни бактериемия отмечается реже, и в этом случае возбудитель может быть выделен из инфицированных лимфатических узлов или из гранулем н селезенке, печени и костной ткани. В целом диагноз бруцеллеза подтверждается результатами посевов только в 15—20% случаев. При установлении диагноза локализованных форм инфекции может возникнуть необходимость в проведении биопсии для выделения возбудителя. В большинстве случаев заболевания диагноз ставят на основании результатов серологических исследований.

Серологические исследования. Повышение титров антител начинается в течение 1-й недели болезни, достигая пика к 3-му месяцу, и затем в течение нескольких месяцев снижаются. Иммуноглобулины этого класса способны сохраняться в организме сроком до нескольких лет. Антитела IgG появляются на 2—3-й неделе от начала заболевания, титры их достигают максимума примерно через 8 нед и сохраняются весь период активной инфекции, благодаря чему они свидетельствуют о продолжающемся активном инфекционном процессе. На фоне проводимого лечения титры антител IgG быстро снижаются и в течение года приближаются к нулю. В случае рецидивов уровни антител IgM и IgG повышаются. Самым надежным серологическим тестом является реакция агглютинации (РА) с бруцеллами в пробирке, посредством которой определяют уровень антител, реагирующих главным образом с липополисахаридными антигенами бруцелл. Увеличение титров антител в 4 и более раз в пробах сыворотки крови, полученных с интервалом 1—4 нед, свидетельствует о недавнем контакте с антигенами бруцелл или сходных с ними микроорганизмов. Реакции должны проводиться с обеими пробами одновременно в одной и той же лаборатории при одинаковых условиях. По данным реакции агглютинации, у большинства больных повышение титров специфических антител отмечается на I—2-й неделе заболевания, а на 3-й неделе фактически у всех происходит сероконверсия. Причиной ложноположительных результатов могут служить проведение кожной пробы на бруцеллез, вакцинация против холеры, а также инфекции, вызванные холерным вибрионом, Francisella tularensis или Yersinia enterocolitica. Причины указанных перекрестных реакций обычно легко выявляются.

Значение результатов серологических исследований. Повышение титров антител в РА до 1: 160 и выше свидетельствует о контакте с антигенами бруцелл или перекрестно реагирующих с ними возбудителей в прошлом или настоящем времени. При достаточно обоснованном подозрении на бруцеллез реакцию следует ставить сывороткой, разведенной до 1:1280, поскольку при наличии блокирующих антител в титрах 1: 640 отмечаются ложноотрицательные результаты. Фактически все больные с бруцеллезом имеют положительные результаты в РА в титре ^1: 160. Более низкие титры не имеют диагностического значения.

Агглютинирующие антитела IgG можно определить в РА путем экстрагирования с 2-меркаптоэтанолом (2-МЭ). При этом агглютинирующие антитела IgM разрушаются, что позволяет определить активность только агглютинирующих антител IgG. Наличие однократного повышения титра (>1:160) в РА с бруцеллами с использованием 2-МЭ является надежным объективным указанием на текущую или имевшую недавно место инфекцию и необходимость проведения лечения. В большинстве случаев даже после предполагаемого полного излечения в течение нескольких лет сохраняется повышенный уровень агглютинирующих антител IgM. Благодаря этому РА с бруцеллами с использованием 2-МЭ, позволяющая определять уровень только антител IgG, является самым надежным индикатором излечения больного.

Другие серологические реакции не имеют каких-либо преимуществ. Кожная проба на бруцеллез имеет не большее значение, чем положительный туберкулиновый тест у больных с подозрением на туберкулез. Более того, она может повлиять на интерпретацию результатов серологических реакций, повышая их титр. Поэтому постановка кожной пробы нецелесообразна.

При проведении реакции агглютинации на бруцеллез используются антигены В. abortus. Антитела к В. melitensis и В. suis перекрестно реагируют с В. abortus, но не с B..canis. Для обнаружения антител к В. canis следует использовать антигены, приготовленные из возбудителя этого вида, коммерческий выпуск которых не налажен.

Другие лабораторные исследования. Иногда у больных отмечается анемия. Количество лейкоцитов в пределах нормы или понижено, СОЭ в пределах нормы или повышена .

источник

Антитела к бруцеллам lgM, IgG, Brucella spp IgM, IgG количественный — количественное определение антител IgM и IgG к бруцеллам (Brucella spp), которые свидетельствуют о наличии острого или перенесённом в прошлом заболевании.

Brucella species — это грамотрицательные аэробные коккобациллы, которые являются внутриклеточными паразитами человека и животных, и вызывающие бруцеллёз.

Бруцеллёз — зоонозная инфекция, передающаяся от больных животных человеку, при котором поражаются практически все органы. Он характеризуется длительным течением, тяжёлыми поражениями костно-суставного аппарата, сердечно-сосудистой и нервной систем. Передаётся человеку через мясо-молочные продукты и при непосредственном контакте с инфицированными тканями животных.

Клиническая картина при бруцеллёзе
Основные клинические проявления бруцеллеза: лихорадка, озноб, общая слабость, недомогание, головная боль, тошнота, рвота, жидкий стул или запоры, потеря аппетита, боли в мышцах и суставах, кашель и одышка при вовлечении лёгких.

Диагностика бруцеллёза — очень сложная задача, так как заболевание не имеет каких-либо специфических признаков, а также может протекать в бессимптомной, хронической и локализованной форме.

Приблизительно 20–40% случаев бруцеллёза — это локализованные формы заболевания, характеризующиеся изолированным поражением какого-либо органа, в большинстве случаев это орган мочеполовой, нервной системы, сердце, а также поражение суставов. Зачастую, локализованный бруцеллёз является последствием нераспознанной ранее остро-септической формы.

Антитела при бруцеллёзе
При инфицировании лимфоциты вырабатывают иммуноглобулины — специальные белки, нейтрализующие бактерии. Первыми начинают вырабатываться иммуноглобулины класса IgM. Уровень их достигает максимума в течение первых недель, а затем постепенно снижается. В крови IgM сохраняются на протяжении нескольких месяцев. Обнаружение в крови IgМ к бруцелле говорит об остром периоде инфекции.

Антитела класса IgG синтезируются через 2–4 недели после инфицирования и могут сохраняться в незначительном количестве в течении длительного времени. После повторного заражения, титр антител повышается вновь. Наличие в крови иммуноглобулинов класса G к бруцеллам говорит о наличие острого или о перенесённом в прошлом заболевании.

В случае заражения бактерией Brucella сначала появляются антитела IgM бруцеллёза, а только через некоторое время антитела IgG. Диагноз острого бруцеллёза имеет место, когда исследование выявило антитела IgM, IgG или только IgM.

Метод ИФА используется для диагностики острой и хронической формы бруцеллёза.

Показания:

  • диагностика бруцеллёза;
  • лихорадка или боли в суставах неясной причины;
  • вхождение в группу риска (работники или жители сельской местности; лица, употребляющие в пищу мясо-молочные продукты домашнего производства).

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 11 часов. Взятие крови производится натощак, спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.

Интерпретация результатов
Антитела IgM:

  • положительный результат составляет более 20 ед/мл;
  • сомнительный результат — 15–20 ед/мл;
  • отрицательный результат в случае IgM-антител составляет менее 15 ед/мл.

Антитела IgG:

  • положительный результат составляет более 30 ед/мл;
  • сомнительный результат — 20–30 ед/мл;
  • отрицательный результат составляет менее 20 ед/мл.

Положительный результат:

  • имеет место текущий острый бруцеллёз;
  • наличие IgG при отсутствии IgM говорит о хронической инфекции или реинфекции бруцеллой.

Отрицательный результат:

  • инфицирование бруцеллой отсутствует;
  • инфицирование бруцеллой имеет место, однако не прошел достаточный срок для выработки иммунного ответа.

источник